PL9fwy3NUQKwZ6t38-bgF0J1QdZkQrFE4p/JxFc_29_7fE_postprocess.srt

1
00:00:01,250 --> 00:00:05,690
بسم الله الرحمن الرحيم نستقبل

2
00:00:05,690 --> 00:00:11,350
ان شاء الله في محاضرة enzymes ووصلنا

3
00:00:11,350 --> 00:00:19,160
المرة السابقة ل measuring enzyme activityبما يتعلق

4
00:00:19,160 --> 00:00:23,460
بالـ Measurement Conditions زي ما اتفقنا إنه لازم

5
00:00:23,460 --> 00:00:30,100
يكون فيه عنا excess amounts of substrate و أيضا أي

6
00:00:30,100 --> 00:00:37,780
cofactors أو coenzymes تلزم لعمل الإنزيم و

7
00:00:37,780 --> 00:00:42,760
زي ما حكينا هذا to handle possible abnormality

8
00:00:42,760 --> 00:00:46,820
high patient enzyme levelsيعني إذا كان إنا كان

9
00:00:46,820 --> 00:00:50,980
عينة المرض بتحتوي على concentration عالية من

10
00:00:50,980 --> 00:00:54,560
الإنزيم يبقى زي ما قولنا ممكن لو عندنا ال

11
00:00:54,560 --> 00:01:00,160
incubation time عشر دقائق ممكن يتم استهلاك ال

12
00:01:00,160 --> 00:01:03,940
substrate الموجود في أول خمس دقائق و الخمس دقائق

13
00:01:03,940 --> 00:01:08,740
التانية مايكونش في عندنا أي زيادة في ال product

14
00:01:08,740 --> 00:01:15,710
عصبي للمثال وبالتالي هيك هيكون في عندنا falselyلو

15
00:01:15,710 --> 00:01:23,370
concentration ل ال product و هذا هيعكس falsely لو

16
00:01:23,370 --> 00:01:27,970
طبعا concentration ل الإنزعاج يبقى عشان هيك بيكون

17
00:01:27,970 --> 00:01:30,790
في عندنا excess amounts of substrate and any co

18
00:01:30,790 --> 00:01:35,000
factorsأيضا ال measurement conditions زي ما اتفقنا

19
00:01:35,000 --> 00:01:38,440
أن أي

20
00:01:38,440 --> 00:01:44,840
أنزيم فيه optimum temperature و فيه optimum pH و

21
00:01:44,840 --> 00:01:50,300
هدول برضه لازم يكونوا متوفرين inhibitors must be

22
00:01:50,300 --> 00:01:57,630
lacking لأنه أكيد يمنعوا عمل الانزيمالحرارة يجب أن

23
00:01:57,630 --> 00:02:03,930
تكون مستمرة بـ ± 0.1 درجة سلسلة خلال الاختبار في

24
00:02:03,930 --> 00:02:10,150
حرارة موجودة فيها الإنزين الآن

25
00:02:10,150 --> 00:02:17,430
في عندنا طريقتين لقياس الـ activity لإنزين في

26
00:02:17,430 --> 00:02:23,970
مجموعة معينة الطريقة الأولى هي الـ fixed-time

27
00:02:23,970 --> 00:02:30,180
methodوالطريقة التانية continuous monitoring

28
00:02:30,180 --> 00:02:36,800
methods أو تسمى kinetics ال fixed-time methods

29
00:02:36,800 --> 00:02:43,000
باستخدام هذه الطريقة بيصير في أنها دمج للمتفاعلات

30
00:02:43,000 --> 00:02:49,520
يبقى المتفاعلات اللازمة لأن ال reagent اللازم مع

31
00:02:49,520 --> 00:02:57,910
ال sample بيتم خلطهم مع بعضو بيتم عمل incubation

32
00:02:57,910 --> 00:03:03,630
at optimum temperature لوقت معين يعني ممكن الوقت

33
00:03:03,630 --> 00:03:09,330
تكون خمس دقائق، عشر دقائق و بعد انتهاء الوقت the

34
00:03:09,330 --> 00:03:15,120
reaction is stoppedو عادةً بتم إيقاف التفاعل عن

35
00:03:15,120 --> 00:03:20,200
طريق إضافة weak acid و ما زال ضفنا weak acid يبقى

36
00:03:20,200 --> 00:03:29,480
أعملنا .. غيرنا ال optimum pH لل enzyme a

37
00:03:29,480 --> 00:03:33,100
measurement is made of the amount of reaction that

38
00:03:33,100 --> 00:03:38,220
has occurred تمام

39
00:03:38,220 --> 00:03:44,960
يبقى بنشوف بعد هيكاللي هو يدّيش صار في عنا تفاعل

40
00:03:44,960 --> 00:03:49,360
يدّيش يعني اتكون ممكن product أو صار في عنا نقص في

41
00:03:49,360 --> 00:03:54,100
substrate the

42
00:03:54,100 --> 00:03:57,220
reaction is assumed to be linear over the reaction

43
00:03:57,220 --> 00:04:03,560
time بيبقى بنحط فرضية في ال fixed time أنه التفاعل

44
00:04:03,560 --> 00:04:07,980
كان عنا linear يعني عنا خلال ال incubation time

45
00:04:07,980 --> 00:04:15,780
اللي صارتكان في عنا زيادة ثابتة في كمية على سبيل

46
00:04:15,780 --> 00:04:21,480
المثال ال product اللي اتكون يعني كل دقيقة مثلا

47
00:04:21,480 --> 00:04:28,200
اتكون عنا كمية محددة من ال product وهذا اتكرر في

48
00:04:28,200 --> 00:04:34,150
الدقائق المختلفةوإذا كان إن الـ incubation time

49
00:04:34,150 --> 00:04:38,210
لعشر دقائق يبقى هيكون فيه زيادة ثابتة في كمية ال

50
00:04:38,210 --> 00:04:42,910
product اللي بينتج خلال العشر دقائق ال incubation

51
00:04:42,910 --> 00:04:46,290
يبقى ال reaction is assumed to be linear over the

52
00:04:46,290 --> 00:04:50,670
reaction time the larger the reaction the more

53
00:04:50,670 --> 00:04:55,790
enzyme is presentطبعاً بعد ذلك في النهاية اللى هو

54
00:04:55,790 --> 00:04:59,810
ال incubation time زى ما قولناه بعد ما نوقف عمل

55
00:04:59,810 --> 00:05:03,790
الانزيم بيصير فينا قياس اللى باستخدام ال

56
00:05:03,790 --> 00:05:06,190
spectrophotometer زى ما اتفقنا المرة السابقة أما

57
00:05:06,190 --> 00:05:09,890
بزيادة ال product بنقص substrate بلو زيادة

58
00:05:09,890 --> 00:05:13,010
coenzyme أو نقص coenzyme يبقى بيصير فينا

59
00:05:13,010 --> 00:05:18,630
measurement وعلى سبيل المثال كمية ال product اللى

60
00:05:18,630 --> 00:05:25,040
انتجت هتعكس لكمية الانزيم اللى موجودةالان هنقل

61
00:05:25,040 --> 00:05:28,020
المشكلة possible problems with extremely high

62
00:05:28,020 --> 00:05:32,860
enzyme levels إذا كان عندنا ال sample كانت بتحتوي

63
00:05:32,860 --> 00:05:36,940
على كمية كبيرة من الانزينأه زي ما حكينا أكتر من

64
00:05:36,940 --> 00:05:42,380
مرة في هذه الحالة ممكن التفاعل عندنا يكون لخمس

65
00:05:42,380 --> 00:05:46,220
دقائق و بعد هيك يصير في عندنا استهلاك ل ال

66
00:05:46,220 --> 00:05:49,560
substrate أو إذا كان في عندنا coenzyme ممكن

67
00:05:49,560 --> 00:05:54,060
بيحتاجوا التفاعل و الخمس دقائق التانية مش هيكون في

68
00:05:54,060 --> 00:06:01,270
عندنا أي زيادة في ال productيبقى زي ما هو واضح هان

69
00:06:01,270 --> 00:06:07,650
في الـ graph هان عندنا الـ time وهان عندنا كمية ال

70
00:06:07,650 --> 00:06:12,990
product اللي اتكولت طبعا هان على أساس انه اللي

71
00:06:12,990 --> 00:06:16,110
هيتم قياسه هو ال product و ال product له maximum

72
00:06:16,110 --> 00:06:22,030
absorbance at wavelengths معينة يبقى ال .. هان في

73
00:06:22,030 --> 00:06:25,370
حال انه كان في عندنا high enzyme concentration في

74
00:06:25,370 --> 00:06:30,580
ال sampleهيمشي عندنا ال sample ممكن أول خمس دقائق

75
00:06:30,580 --> 00:06:34,940
يعني على سبيل المثال زي ما قلنا هيصير في عندنا

76
00:06:34,940 --> 00:06:41,100
استهلاك لالممكن ال substrate الموجود وبالتالي مش

77
00:06:41,100 --> 00:06:44,260
هيتبقى substrate اللي هو ال enzyme يحوله قليل إلى

78
00:06:44,260 --> 00:06:47,800
ال product يبقى احنا لما بنيجي بنشتغل بال fixed

79
00:06:47,800 --> 00:06:51,000
time زي ما قلنا بنضيف ال reactants اللي هو ال

80
00:06:51,000 --> 00:06:54,700
reagent مع ال sample اللي عندي وبعمل ال incubation

81
00:06:54,700 --> 00:06:56,120
العشر دقائق

82
00:06:58,550 --> 00:07:04,550
وباجى فى نهاية العشر دقائق باجى بقرأ اللى وجداش

83
00:07:04,550 --> 00:07:09,210
كمية ال product اللى اتكونت عنديتمام؟ يبقى أنا مش

84
00:07:09,210 --> 00:07:14,330
عارف فعليا إيش اللي صار خلال العشر دقائق هذه هل

85
00:07:14,330 --> 00:07:18,870
كان عندنا فعليا linear increase في ال product خلال

86
00:07:18,870 --> 00:07:23,130
العشر دقائق لغاية ما تم إيقاف التفاعل ولا زي

87
00:07:23,130 --> 00:07:26,650
الحالة هذه زي ما أحنا شايفين أنه كان في عندنا

88
00:07:26,650 --> 00:07:30,430
زيادة في ال product أول خمس دقائق وبعد ذلك صار في

89
00:07:30,430 --> 00:07:33,950
عندنا ثبات في كمية ال product لأن ال substrate

90
00:07:34,370 --> 00:07:39,370
انتهدى، بيها دى المشكلة بى ال fixed-time methods

91
00:07:39,370 --> 00:07:43,270
يبى احنا بنعمل incubation لعشر دقائق، بيجيب بنقيس

92
00:07:43,270 --> 00:07:46,810
في نهاية العشر دقائق لكن فعليا ايش اللى صار خلال

93
00:07:46,810 --> 00:07:52,930
العشر دقائق مش هنكون عارفين وكما ذكرنا سابقا انه

94
00:07:52,930 --> 00:07:58,510
هان هيعطينى falsely low طبعا product concentration

95
00:07:58,510 --> 00:08:02,890
وبالتالي هذا هيكسلى ان في عندي low enzyme

96
00:08:02,890 --> 00:08:07,340
concentrationطيب الطريقة الأخرى اللي هو ال

97
00:08:07,340 --> 00:08:11,300
continuous monitoring method أو ال kinetics هان

98
00:08:11,300 --> 00:08:16,080
عندنا بيصير multiple measurements اللي هو ال

99
00:08:16,080 --> 00:08:19,040
absorbance باستخدام ال spectrophotometer بيبقى مش

100
00:08:19,040 --> 00:08:22,560
قراءة واحدة فقط زي ال fixed time لأ هان بيكون في

101
00:08:22,560 --> 00:08:30,830
عندنا أكتر من قراءة اللي بيتم أخذها خلال التفاعلو

102
00:08:30,830 --> 00:08:35,430
القراءات هذه either at specific time intervals

103
00:08:35,430 --> 00:08:41,630
يعني ممكن كل تلاتين ثانية ناخد قراءة أو ممكن

104
00:08:41,630 --> 00:08:45,550
continuously by a continuous recording

105
00:08:45,550 --> 00:08:49,770
spectrophotometer وفي عندنا أجهزة أجهزة

106
00:08:49,770 --> 00:08:50,750
spectrophotometer

107
00:08:52,790 --> 00:08:57,770
ممكن يصير في عندنا سحب لعينة و طبعا الجهاز بيكون

108
00:08:57,770 --> 00:09:04,430
مبرمج و مبرمج يعني هان مثلا انه يقرألي كل تلاتين

109
00:09:04,430 --> 00:09:09,200
ثانية و يقرألي مثلا أربع قراءات أو ست قراءاتو

110
00:09:09,200 --> 00:09:12,760
الطريقة التانية برضه ممكن يتم برمجة الجهاز أنه

111
00:09:12,760 --> 00:09:17,940
باستمرار يقرأ لي كيف كان الزيادة على سبيل المثال

112
00:09:17,940 --> 00:09:22,220
في ال product بي hand بيكون زي ما قلنا إما at

113
00:09:22,220 --> 00:09:26,960
specific time intervals أو continuously تمام طول

114
00:09:26,960 --> 00:09:31,940
الوقت يقعد بياخد قراءات للتفاعل اللي بيصير وكمية

115
00:09:31,940 --> 00:09:35,160
ال product اللي على سبيل المثال بتنتج

116
00:09:37,310 --> 00:09:42,310
طبعا الطرق هذه الأسواق باستخدام الـ specific time

117
00:09:42,310 --> 00:09:46,270
أو الـ continuously طبعا أفضل من الـ fixed-time

118
00:09:46,270 --> 00:09:50,490
method because the linearity of the reaction may

119
00:09:50,490 --> 00:09:53,150
be more adequately verified يعني من خلال هذه

120
00:09:53,150 --> 00:10:00,310
الطريقة ممكن نتأكد إذا كان فعلا التفاعل كان linear

121
00:10:00,310 --> 00:10:06,510
و استمر linear أو لا و لو صار في عندناأي مشكلة في

122
00:10:06,510 --> 00:10:10,730
التفاعل ويبطل

123
00:10:10,730 --> 00:10:17,730
يصير مثلا يتكون product يبقى هيبين عن دهان مباشرة

124
00:10:17,730 --> 00:10:24,350
تمام بيجهد الطريقة أفضل من الطريقة الأولىif

125
00:10:24,350 --> 00:10:26,850
absorbance is measured at intervals several data

126
00:10:26,850 --> 00:10:30,370
points are necessary to increase the accuracy of

127
00:10:30,370 --> 00:10:34,630
linearity assessment بجهة هام ده ناخد أكثر من

128
00:10:34,630 --> 00:10:42,430
قراءة ممكن ناخد مثلا أربع قراءات قراءة بعد ممكن

129
00:10:42,430 --> 00:10:48,510
تلاتين ثانية ستين تسعين مية وعشرين وبعدين ممكن إيش

130
00:10:48,510 --> 00:10:56,700
نعمل نطرح ال absorbanceاللي تم قراءته مثلا على وقت

131
00:10:56,700 --> 00:11:00,580
ستين ثانية من ال absorbance اللي على تلاتين ثانية

132
00:11:00,580 --> 00:11:05,400
حيكون في عندى الفرق ال absorbance، الآن مرة تانية

133
00:11:05,400 --> 00:11:10,230
بقرأاللي ال absorbance على 90 وبنقصه من ال

134
00:11:10,230 --> 00:11:15,450
absorbance اللي على 60 المفروض الرقم ال absorbance

135
00:11:15,450 --> 00:11:20,850
اللي هو ال 90 minus ال 60 و ال 60 minus ال 30 يكون

136
00:11:20,850 --> 00:11:25,630
في عنا ال absorbance ثابت إذا كان التفاعل linear

137
00:11:25,630 --> 00:11:31,410
يبقى زي ما هو واضح هان بال figure هي هان عنا ال

138
00:11:31,410 --> 00:11:35,170
absorbance وعنا قراءات على 30 ثانية و 60 و 90 و

139
00:11:35,170 --> 00:11:39,770
120طبعا زى ما قولنا بعد هيك بنعمل بنشوف ال

140
00:11:39,770 --> 00:11:46,790
absorbance على ستين و بننقصها من القراءة اللى كانت

141
00:11:46,790 --> 00:11:55,910
على تلاتين ثانية هيعطينى فرق طبعا الفرق هذا بدى

142
00:11:55,910 --> 00:12:00,630
يساوي اللى هو الفرق فى ال absorbance لما نيجى نطرح

143
00:12:00,630 --> 00:12:03,710
ال absorbance على تسعين ناقص ال absorbance على

144
00:12:03,710 --> 00:12:09,270
ستين طبعا بيجى هيك بدلإذا كان هنا إن كانت الزيادة

145
00:12:09,270 --> 00:12:14,070
ثابتة ممكن يعني على سبيل المثال يقول مثلا point 2

146
00:12:14,070 --> 00:12:19,070
في ال absorbance و هنا point 2 في ال absorbance

147
00:12:19,070 --> 00:12:27,770
يبقى معناته عندنا التفاعل linear لكن لو بعد هيك

148
00:12:27,770 --> 00:12:34,510
صار في عندنا مشكلة خلص ال substrate مثلاطبعا يعني

149
00:12:34,510 --> 00:12:38,810
مثلا هان لو قلنا على مثلا مية و خمسين على سبيل

150
00:12:38,810 --> 00:12:46,530
المثال طبعا و اجينا اخدنا مية و خمسين ناقص مية و

151
00:12:46,530 --> 00:12:51,010
عشرين هلاجي انه هان ال absorbance ممكن صارت مثلا

152
00:12:51,010 --> 00:12:58,490
point واحد خمسة اه ابقى بعرف انا انه لغاية مية و

153
00:12:58,490 --> 00:13:06,230
عشرين كان عندى التفاعل linearو بعد هيك ممكن يكون

154
00:13:06,230 --> 00:13:10,290
صار في عندى نقص فيه ال substrate على سبيل المثال

155
00:13:10,290 --> 00:13:15,850
طبعا بيجي أمتى بيصير في عندى مشكلة نقص فيه

156
00:13:15,850 --> 00:13:19,350
substrate نقص فيه coenzyme يبقى على طول بيبين عندى

157
00:13:19,350 --> 00:13:23,390
من خلال ال continuous monitoring

158
00:13:27,030 --> 00:13:33,370
احنا زي ما اتفقنا سابقا انه النتائج المختبر عادة

159
00:13:33,370 --> 00:13:37,730
بيكون فيه عندى بما يتعلق في الانزيمات طبعا بيكون

160
00:13:37,730 --> 00:13:42,130
activity اذا كان زى ما حكينا قصنا اللى هو ال

161
00:13:42,130 --> 00:13:48,290
activity للانزيم ومش كمية الانزيم الموجودة يبقى ال

162
00:13:48,290 --> 00:13:54,050
units لإصدار النتائج عندنا international unit

163
00:13:56,030 --> 00:13:59,550
والتعريف الـ international unit الـ amount of

164
00:13:59,550 --> 00:14:03,250
enzyme that will convert one micromole of

165
00:14:03,250 --> 00:14:07,950
substrate per minute in specified conditions

166
00:14:07,950 --> 00:14:12,390
والنتيجة عادة بيصلها reporting على international

167
00:14:12,390 --> 00:14:17,830
unit per liter بهيك بيكون بيصير إصدار لنتيجة ال

168
00:14:17,830 --> 00:14:22,780
enzymes اللي هو ال activity of enzymesفي عندنا

169
00:14:22,780 --> 00:14:26,220
unit أخرى اللي هي ال international system of units

170
00:14:26,220 --> 00:14:33,740
و ال .. ال unit هان catal و ال catal هي عبارة عن

171
00:14:33,740 --> 00:14:37,500
mole per second يبقى ال moles of substrate

172
00:14:37,500 --> 00:14:42,780
converted per second و بيصير عندنا reporting

173
00:14:42,780 --> 00:14:50,400
للنتيجة catal per liter و ممكن تحويل ال

174
00:14:50,400 --> 00:14:55,330
international unitالى catal ان ال one

175
00:14:55,330 --> 00:15:04,370
international unit بتساوي seventeen nano catal طيب

176
00:15:04,370 --> 00:15:09,650
قولنا ان احنا عادة بنقيس ال activity لكن مش ممكن

177
00:15:09,650 --> 00:15:14,430
نقيس ال ال mass ال concentration ل ال enzyme ممكن

178
00:15:14,430 --> 00:15:20,560
ممكن ايضا و في عندنا فعليا عدد منالفحوصات اللى

179
00:15:20,560 --> 00:15:25,060
بيتم عن طريق قياس ال mass of enzyme الو ال

180
00:15:25,060 --> 00:15:31,420
concentration of enzyme يبقى

181
00:15:31,420 --> 00:15:34,580
هان زى ما قولنا بنقيس كمية ال enzyme لكن فيه أنه

182
00:15:34,580 --> 00:15:39,880
يعني ممكن بعض المشاكل اللى بتواجه هذه الطريقة و من

183
00:15:39,880 --> 00:15:44,120
هذه المشاكل طبعا احنا اذا كان بندنقيس ال ال enzyme

184
00:15:44,120 --> 00:15:47,780
mass ال concentration لأ ال enzyme يبقى بندنستخدم

185
00:15:47,780 --> 00:15:52,420
antibodyعاقبنا نعمل detection للانزيم الموجود

186
00:15:52,420 --> 00:15:57,140
باستخدام antibody يستهدف هذا الانزيم أو ال ISO

187
00:15:57,140 --> 00:16:01,760
انزيم وبالتالي المشاكل اللي ممكن واجهها بهذه

188
00:16:01,760 --> 00:16:04,780
الحالة أنه يصير في عنا cross reactivity with

189
00:16:04,780 --> 00:16:09,900
inactive enzymes يعني ممكن يكون أنا عندى موجود بال

190
00:16:09,900 --> 00:16:15,860
sample انزيمات بعض من هذه الانزيمات active وبعض من

191
00:16:15,860 --> 00:16:21,300
هذه الانزيماتnon-functional, inactive, denatured

192
00:16:21,300 --> 00:16:27,120
ممكن يبقى لما أنا بقاشي بستخدم ال antibody إذا كان

193
00:16:27,120 --> 00:16:30,500
ال Epitope اللي بديجي يرتبط معاه ال antibody سليم

194
00:16:30,500 --> 00:16:34,520
مافيش فيه مشكلة مافيه أي تغير يبقى ال antibody

195
00:16:34,520 --> 00:16:39,620
هيرتبط بغض النظر إنه هل ال enzyme active أو

196
00:16:39,620 --> 00:16:46,450
inactiveطبعا يبقى زي ما قلنا ممكن يعملى reactivity

197
00:16:46,450 --> 00:16:50,490
with inactive enzymes أو ممكن يعملى مع inactive

198
00:16:50,490 --> 00:16:56,790
isoenzymes و أيضا ممكن انتباهي حتى يرتبط مع

199
00:16:56,790 --> 00:17:00,880
partially digested enzymeيبقى حتى إذا كان جزء من

200
00:17:00,880 --> 00:17:05,100
الانزيم يعني الانزيم صار له breakdown لكن في عندي

201
00:17:05,100 --> 00:17:10,240
الجزء من الانزيم اللي بيرتبط مع ال antibody لسه

202
00:17:10,240 --> 00:17:14,100
سليم وما صارلوش degradation يبقى ال antibody برضه

203
00:17:14,100 --> 00:17:21,180
هيرتبط وممكن يعملي يعني

204
00:17:21,180 --> 00:17:27,240
يعطيني falsely high concentration للانزيم

205
00:17:28,730 --> 00:17:32,610
تمام بيه هذه المشكلة اللي بتواجهنا في قياس ال

206
00:17:32,610 --> 00:17:37,090
concentration وعشان هيك يعني عشان نتجنب هذه

207
00:17:37,090 --> 00:17:43,240
المشكلة لازم يصير في عنا مقارنة يا بالما نعتمدأي

208
00:17:43,240 --> 00:17:48,560
قياس لـ enzyme concentration أو enzyme mass لابد

209
00:17:48,560 --> 00:17:56,120
من عمل experiment نشوف إيش العلاقة بين ال enzyme

210
00:17:56,120 --> 00:18:00,550
activity مع ال enzyme massالعلاقة بين عملية

211
00:18:00,550 --> 00:18:08,590
الانزيم ومجموعة الانزيم عامة عامة بشكل عام لكن يجب

212
00:18:08,590 --> 00:18:13,970
أن تكون محدودة لكل انزيم لازم نحدد لكل انزيم ان هل

213
00:18:13,970 --> 00:18:20,990
فعلا ال activity متوافقة مع ال quantity او لا

214
00:18:20,990 --> 00:18:23,710
انزيم

215
00:18:24,210 --> 00:18:26,810
يمكن أيضًا أن يكون قرر ويقوم بالتقريب من تقنية

216
00:18:26,810 --> 00:18:38,950
Electrophoresis التي تقدر تقريبًا ويقدر

217
00:18:38,950 --> 00:18:41,630
تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا

218
00:18:41,630 --> 00:18:41,870
تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا

219
00:18:41,870 --> 00:18:42,330
تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا

220
00:18:42,330 --> 00:18:46,430
تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا تقريبًا

221
00:18:52,560 --> 00:18:59,620
للـ Bands المختلفة هيك بنكون حكينا يعني مقدمة

222
00:18:59,620 --> 00:19:04,820
بسيطة عن الإنزيمات وكيفية قياسها والآن هنبدأ في

223
00:19:04,820 --> 00:19:13,140
التحدث عن بعض من الإنزيمات المهمة الموجودة في جسم

224
00:19:13,140 --> 00:19:18,980
الإنسان في عندنا من الإنزيمات اللي هنحكي عليها الـ

225
00:19:18,980 --> 00:19:22,110
Acid Phosphataseطبعا هنا لدينا الانزيم وهنا لدينا

226
00:19:22,110 --> 00:19:26,430
ال clinical significance يعني مرتبط ممكن بأي مرض

227
00:19:26,430 --> 00:19:30,730
acid phosphatase بالبرستاتيكارسينوما في عندنا ALT

228
00:19:30,730 --> 00:19:37,630
في ال hepatic disorder يبجي طبعا الارتفاع في

229
00:19:37,630 --> 00:19:42,090
الانزيم بيدل على مشكلة في organ معين وزي ما قلنا

230
00:19:42,090 --> 00:19:48,330
هذا مرتبط في وجود كميات من هذا الانزيم في داخل

231
00:19:48,330 --> 00:19:52,620
خلايا التشوكيعني إذا كان نحكي على ALT وإذا كان

232
00:19:52,620 --> 00:19:56,400
صرفي عندي Hepatic Disorder هيرتفع ال ALT ليش؟ لأنه

233
00:19:56,400 --> 00:20:00,320
فعليا عندي concentration عالية من ال ALT في خلايا

234
00:20:00,320 --> 00:20:04,500
الكبد عندنا أيضا alkaline phosphatase اللي هو ال

235
00:20:04,500 --> 00:20:07,420
hepatic disorder أو ال bone disorder عندنا

236
00:20:07,420 --> 00:20:13,870
الamylase بال acute pancreatitisAspartate, Amino

237
00:20:13,870 --> 00:20:17,830
Transferase والـ AST بأكتر من شغلة Myocardial

238
00:20:17,830 --> 00:20:20,410
Infarction, Hepatic Disorder, Skeletal Muscle

239
00:20:20,410 --> 00:20:26,510
Disorder, Keratin Kinase, Myocardial Infarction

240
00:20:26,510 --> 00:20:29,250
وSkeletal Muscle Disorder طب زي ما هنشوف الآن كمان

241
00:20:29,250 --> 00:20:32,390
شوية يعني لما بنقول مثلا keratin kinase طب هي

242
00:20:32,390 --> 00:20:37,030
عندنا بالقلب وعندنا بال skeletal musclesطيب يعني

243
00:20:37,030 --> 00:20:40,310
لما يرتفع أن الكرياتين كينيس ده كيبنا نعرف إيش

244
00:20:40,310 --> 00:20:44,710
المشكلة هان بييجي دور ال ISO-enzymes زي ما هنشوف

245
00:20:44,710 --> 00:20:48,650
أنه في أننا الإنزيمات هذه اللي مرتبطة بأكتر من

246
00:20:48,650 --> 00:20:53,530
مشكلة في ممكن إلها ISO-enzymes وإذا كان قصنا ال

247
00:20:53,530 --> 00:20:58,330
ISO-enzymes ممكن نحدد بالظبط هل المشكلة ع سبيل

248
00:20:58,330 --> 00:21:02,590
مثال القلب في هذه الحالة أو في العضلات gamma

249
00:21:02,590 --> 00:21:08,390
glutamyl transferase hepatic disorderG6PD Drug

250
00:21:08,390 --> 00:21:12,010
-Induced Pneumonia لكتير ديهيدروجينيز برضه مطابق

251
00:21:12,010 --> 00:21:14,990
بأكتر من Disorder هانمي Cardial Infarction،

252
00:21:14,990 --> 00:21:20,710
Hepatic Disorder و Carcinoma نبدأ بالإنزيم الأول

253
00:21:20,710 --> 00:21:27,410
كرياتين كينيز واختصاره CK هذا

254
00:21:27,410 --> 00:21:31,090
الإنزيم طبعا احنا حكينا قبل هيك على الكرياتين

255
00:21:32,710 --> 00:21:38,110
الكينيز لما حكينا عن تكوين الكرياتينين هذا الانزيم

256
00:21:38,110 --> 00:21:42,470
مرتبط بـ Regeneration and Storage of High Energy

257
00:21:42,470 --> 00:21:46,610
Phosphate اللي هو الـ ATP و زي ما قولنا هذا اللي

258
00:21:46,610 --> 00:21:50,570
موجود في العضلات it catalyzes the following

259
00:21:50,570 --> 00:21:56,530
reversible reaction in the body الكرياتين مع ATP

260
00:21:56,530 --> 00:22:01,390
في وجود الكرياتين كينيز بيعطين كرياتين فوسفات زاد

261
00:22:01,390 --> 00:22:07,470
ATPوهذا التفاعل يسير في الاتجاهين غالب يمكن

262
00:22:07,470 --> 00:22:10,010
كرياتين مع ATP في وجود الكرياتين كينيز يعطيني

263
00:22:10,010 --> 00:22:13,930
كرياتين فوسفات و ADP و الكرياتين فوسفات مع ADP في

264
00:22:13,930 --> 00:22:21,970
وجود الكرياتين كينيز هيعطيني كرياتين و ATP ال

265
00:22:21,970 --> 00:22:26,260
high concentration of keratin kinaseموجود يبقى وان

266
00:22:26,260 --> 00:22:29,640
موجود هذا الانزيم ب concentration عالية في اي

267
00:22:29,640 --> 00:22:33,980
tissue في اي خلايا عندنا موجود بال skeletal muscle

268
00:22:33,980 --> 00:22:41,600
cardiac muscle و ايضا brain tissue طيب

269
00:22:41,600 --> 00:22:46,340
الان لو لجينا ان في عندنا زيادة في انزام الكرياتين

270
00:22:46,340 --> 00:22:50,720
kinase activity في ال plasmaيبقى هذا أكيد بده يكون

271
00:22:50,720 --> 00:22:57,720
صار فينا damage لواحدة من هذه ال tissues المختلفة

272
00:22:57,720 --> 00:23:04,020
الزيادة في ال keratin kinase useful to diagnose

273
00:23:04,020 --> 00:23:09,680
acute myocardial infarction يبقى بتلعب دور مهم في

274
00:23:09,680 --> 00:23:17,510
ال diagnosis لجلطات اللي بتصير في القلبو أيضا في

275
00:23:17,510 --> 00:23:22,730
حالات الأمراض متعلقة بالعضلات زي ال muscular

276
00:23:22,730 --> 00:23:28,930
dystrophy طبعا زي ما قلنا انه لوحده ال keratin

277
00:23:28,930 --> 00:23:34,370
kinase يعني مش هيعطيني دلالة معينة يعني لو جينا

278
00:23:34,370 --> 00:23:36,430
اشتغلنا ال keratin kinase و لجينا ال keratin

279
00:23:36,430 --> 00:23:41,700
kinase مرتفعطب هل ال .. ال .. ال .. ال enzyme هذا

280
00:23:41,700 --> 00:23:46,160
صاله release من خلايا القلب؟ صاله release من خلايا

281
00:23:46,160 --> 00:23:51,000
العضلات؟ صاله release من ال .. ال brain؟ تمام؟

282
00:23:51,000 --> 00:23:55,340
يبقى ال enzyme لوحده أه مش هيفيد كتير يعني هيقولنا

283
00:23:55,340 --> 00:23:59,660
أنه في مشكلة في أحد اللي هو ال tissues التلاتة هذه

284
00:23:59,660 --> 00:24:03,940
لكن وين بالظبط؟ مش هنقدر نعرف وزي ما حكينا هن بيجي

285
00:24:03,940 --> 00:24:06,480
دور ال ISO enzymes

286
00:24:08,380 --> 00:24:15,600
وفعليا في عندي تلاتة iso enzymes ل الكرياتين كينيز

287
00:24:15,600 --> 00:24:22,020
و ال iso enzymes المختلفة بتتكون من two different

288
00:24:22,020 --> 00:24:28,080
polypeptide chains ففي عندي سلسلتين من ال

289
00:24:28,080 --> 00:24:32,240
polypeptide هدول هم اللي بيعملولي هذا ال enzyme

290
00:24:34,870 --> 00:24:39,490
عنا ال polypeptides ال chain هذه في عنا ال

291
00:24:39,490 --> 00:24:44,930
polypeptide M و ال polypeptide التانية B الآن هدول

292
00:24:44,930 --> 00:24:49,850
أي polypeptides هيرتبطوا مع بعض هيعطوني ال ISO

293
00:24:49,850 --> 00:24:53,810
enzymes المختلفة يعني إذا كان عندي كانت ال two

294
00:24:53,810 --> 00:24:59,810
polypeptides B يبقى هذا هيكون CK1 وهذا ال ISO

295
00:24:59,810 --> 00:25:05,130
enzyme اللي موجود في ال brain إذا كان عنديوحدة

296
00:25:05,130 --> 00:25:08,850
بوليبيبتايد M والبوليبيبتايد التانية B يبقى هذا

297
00:25:08,850 --> 00:25:16,750
CK2 وهذا موجود في القلب اللي هو Cardic-type أو

298
00:25:16,750 --> 00:25:21,090
بيسمى أيضًا Hybrid-type هجين لأنه عندي واحدة من M

299
00:25:21,090 --> 00:25:26,810
وواحدة من B يعني CK2 أو CKMP وهذا برضه ممكن يكون

300
00:25:26,810 --> 00:25:32,930
CKBB والعيزوينزايم التالت عندي ال two polypeptides

301
00:25:32,930 --> 00:25:39,270
اللي هو M-typeوبهذه الحالة بنقول إنه CKMM أو CK3

302
00:25:39,270 --> 00:25:44,690
وهذا النوع الموجود في العضلات يبقى ال ISO enzymes

303
00:25:44,690 --> 00:25:50,030
بتفيدن كتير بهذه الحالة زي ما قلنا إذا كان لمريد

304
00:25:50,030 --> 00:25:54,870
فحصنا ال CK ولاجيناه مرتفع يبقى لازم نفحص ال ISO

305
00:25:54,870 --> 00:25:59,890
enzymes عشان نشوفالارتفاع في أي ايزو انزايم

306
00:25:59,890 --> 00:26:07,050
وبالتالي يدلنا على ال tissue اللي فيه المشكلة طيب

307
00:26:07,050 --> 00:26:10,850
الـ Unnormal Serum consists of approximately 94%

308
00:26:10,850 --> 00:26:17,570
to 100% CKMM يبقى الكرياطين كينيز اللي موجود في

309
00:26:17,570 --> 00:26:24,200
البلازمةمعظمه اللي هو من النوع CKMM اللي له علاقة

310
00:26:24,200 --> 00:26:30,680
بالـ muscle type 94% ل 100% من الـ CK الموجود في

311
00:26:30,680 --> 00:26:35,320
البلازمة بشكل طبيعي هو الـ CKMM

312
00:26:39,190 --> 00:26:44,450
الان بما يتعلق بال cardiac muscle اللي هو

313
00:26:44,450 --> 00:26:48,670
الكيريتينكانيزي الموجود في عضلة القلب عندنا موجود

314
00:26:48,670 --> 00:26:57,830
انه عين موجود عندنا 80% CKMM أيضا لكن في عندنا 20%

315
00:26:57,830 --> 00:27:03,930
CKMP اللي هو هذا خاص بعضلة القلب

316
00:27:09,740 --> 00:27:14,080
طبعا ممكن يتم فصل هذه الـ Isoenzymes زي ما حكينا

317
00:27:14,080 --> 00:27:18,660
سابقا باستخدام الـ Electrophoresis و هنحصل على

318
00:27:18,660 --> 00:27:27,660
الأنواع المختلفة BB migrate fastest to a node than

319
00:27:27,660 --> 00:27:33,600
MB and MM يبقى الأسرع بيكون هو ال BB و بعدين ال MB

320
00:27:33,600 --> 00:27:35,660
و بعدين ال MM

321
00:27:38,340 --> 00:27:41,520
زي ما اتفقنا انه the major isoenzyme in the sera

322
00:27:41,520 --> 00:27:44,860
of healthy people is the M M form اللي قولنا بشكل

323
00:27:44,860 --> 00:27:50,500
94 إلى 100% طيب ال isoenzyme المهم اللي هو اللي له

324
00:27:50,500 --> 00:27:54,620
علاقة بالقلب و المشاكل اللي بالقلب زي ما اتفقنا

325
00:27:54,620 --> 00:28:00,460
انه ال Mb isoenzyme يداش نسبته ال Mb isoenzyme في

326
00:28:00,460 --> 00:28:07,170
ال normal persons اما undetectableيعني ممكن نفحص

327
00:28:07,170 --> 00:28:11,790
ال CKMP ونلاقيه مش موجود طبعا نحكي على الأشخاص ال

328
00:28:11,790 --> 00:28:18,110
healthy الطبيعيين وممكن يصل لغاية أقل من 6% of

329
00:28:18,110 --> 00:28:24,490
total keratin kinase يبقى لغاية أقل من 6% ال CKMP

330
00:28:24,490 --> 00:28:28,930
بيكون عندنا طبيعي يبقى undetectable لغاية أقل من 6

331
00:28:28,930 --> 00:28:35,850
%ارتفع عن هيك يبقى معناته احتمال انه في انا مشكلة

332
00:28:35,850 --> 00:28:41,830
في عضلة القلب it also appears that ckbb is present

333
00:28:41,830 --> 00:28:45,050
in small quantities in the sera of healthy people

334
00:28:45,050 --> 00:28:49,050
يبقى موجود لكن بكميات قليلة جدا الوانوء التالت ال

335
00:28:49,050 --> 00:28:55,810
ckbb و اللي قولنا خاص بالبراين ال diagnostic

336
00:28:55,810 --> 00:29:00,420
significance لهذا الانزينالقيمة الخاصة بـ CK

337
00:29:00,420 --> 00:29:03,420
-Enzyme Separation يمكن أن تكون وجدتها في الوصول

338
00:29:03,420 --> 00:29:07,560
إلى إيجابة تدمير ميوكارديال يبقى لازم، كما قلنا،

339
00:29:07,560 --> 00:29:11,400
إذا كان إشتغلنا و لجينا الـ keratin kinase الـ

340
00:29:11,400 --> 00:29:19,020
total مرتفع يبقى لازم نشتغل الـ enzyme كارد يكتشف

341
00:29:19,020 --> 00:29:22,860
مقاومة كامة كبيرة من الـ CKMP قلنا تقريبا نسبة تصل

342
00:29:22,860 --> 00:29:30,640
لـ 20%والزيادة في الـ CKMP لأكتر من 6% is a strong

343
00:29:30,640 --> 00:29:35,360
indication of acute myocardial infarction اللي وأن

344
00:29:35,360 --> 00:29:41,060
الـ C صار فينا جلطة في القلب وصار فينا موت لجزء من

345
00:29:41,060 --> 00:29:46,080
خلايا القلب وبالتالي بدأ يصير عندنا release لهذا

346
00:29:46,080 --> 00:29:50,590
ال ISO enzyme وارتفعت ال concentration تبعتهفي

347
00:29:50,590 --> 00:29:55,330
الدم إذا كان زيادة عن 6% يبقى هذا strong

348
00:29:55,330 --> 00:30:00,430
indication of acute myocardial infarction طيب كيف

349
00:30:00,430 --> 00:30:07,930
بتصير الزيادة وحسب الوقت يعني بعد حدوث مثلا الجلطة

350
00:30:07,930 --> 00:30:10,290
ال acute myocardial infarction كيف بتصير الزيادة

351
00:30:10,290 --> 00:30:14,650
لل CKMP CKMP increases four to eight hours post

352
00:30:14,650 --> 00:30:20,190
acute myocardial infarctionبتبدأ تزيد بعد 4 إلى 8

353
00:30:20,190 --> 00:30:27,430
ساعات إمتى بتصل إلى أعلى مستوياتها بعد 12 إلى 24

354
00:30:27,430 --> 00:30:32,170
ساعة بيبقى بعد ما يصاب الشخص ب acute myocardial

355
00:30:32,170 --> 00:30:36,710
infarction ب 24 ساعة لو أجينا و قصنا ال CKMP

356
00:30:36,710 --> 00:30:41,550
بنلاقي إنه هذا أعلى level ممكن يصله ال CKMP بعد

357
00:30:41,550 --> 00:30:47,040
هيك أش بيصير ببدأ ال concentration بالنزولو بترجع

358
00:30:47,040 --> 00:30:54,480
ال concentration للمستوى الطبيعي بعد 48 إلى 72

359
00:30:54,480 --> 00:31:02,840
ساعة طيب بقاش بتفيدني ان اعرف امتى بيرتفع امتى

360
00:31:02,840 --> 00:31:07,600
بيصل لأعلى مستوياته امتى بيرجع للطبيعي عشان لما

361
00:31:07,600 --> 00:31:13,620
يجي شخص للمستشفى او للمختبر و بدنا نفحصله هذا

362
00:31:13,620 --> 00:31:21,590
الفحصيعني الآن إذا كان شخص حاس مثلا في ضيق بالصدر

363
00:31:21,590 --> 00:31:27,830
و ثقوبة بالتنفس يبل خلينا نقول خمس أيام مثلا و

364
00:31:27,830 --> 00:31:34,610
بعدين إجا على المستشفى هل بنفع أن أقسله ال CKMP

365
00:31:34,610 --> 00:31:40,370
أكيد بنفعش ليش لأنه returns to normal within 48 to

366
00:31:40,370 --> 00:31:47,640
72 hours تمام؟طب امتى افحصله؟ انا زى ما قولنا انه

367
00:31:47,640 --> 00:31:52,620
بعد اربع ساعات ممكن يبدأ اللى يتظهر عندى اللى هو

368
00:31:52,620 --> 00:31:57,340
علامة الارتفاع طبعا ممكن يبدأ اللى هو التدخل وممكن

369
00:31:57,340 --> 00:32:00,540
يقيصه بعد هيك بعد اللي هو اتناشر اربعة او اربع

370
00:32:00,540 --> 00:32:03,940
عشرين ساعة واذا كان لجوا انه فعلا اتفع اكتر ال

371
00:32:03,940 --> 00:32:09,240
CKMP بجهد باكد ال diagnosisيبقى الأوقات مهمة عشان

372
00:32:09,240 --> 00:32:15,460
نعرف إيش الفحص اللي نعمله في الحالات المرضية

373
00:32:15,460 --> 00:32:16,840
المختلفة

374
00:32:21,860 --> 00:32:26,500
وهذا ال figure اللي بيوضح يعني لو جينا عملنا

375
00:32:26,500 --> 00:32:30,180
Electrophoresis و بعد هيك استخدمنا ال densitometer

376
00:32:30,180 --> 00:32:35,260
زي ما حكينا لما حكينا عن ال proteins و ال area

377
00:32:35,260 --> 00:32:39,440
under the graph بيعكس الكمية ال ISO enzyme

378
00:32:39,440 --> 00:32:44,050
الموجود، بشخص طبيعيهي عندنا كمية الـ isoenzyme

379
00:32:44,050 --> 00:32:48,550
اللي هو CK2 أو CKMP وزي ما قلنا إنه النسبة الأكبر

380
00:32:48,550 --> 00:32:55,490
بتكون لـ CKMM وهذا بيكون أقل من 6% لكن الحالة

381
00:32:55,490 --> 00:32:58,370
التانية اللي هو a patient with acute myocardial

382
00:32:58,370 --> 00:33:01,870
infarction زي ما أحنا شايفين إنه صار في عندنا

383
00:33:01,870 --> 00:33:07,090
ارتفاع في ال concentration لـ CKMP وزي ما قلنا هذا

384
00:33:07,090 --> 00:33:09,930
ممثل بالـ area under the peak

385
00:33:16,400 --> 00:33:21,100
هذا الـ graph بيوضح لي كيف بيصير الارتفاع في

386
00:33:21,100 --> 00:33:25,400
الانزيمات المختلفة في حال صار فينا acute

387
00:33:25,400 --> 00:33:28,440
myocardial infarction وأي انزيمات اللي هي بترتفع

388
00:33:28,440 --> 00:33:34,110
ال concentration بتاعتهاأكثر من الانزيمات الأخرى

389
00:33:34,110 --> 00:33:38,410
زي ما هو واضح أنه فيها نفسير ارتفاع بال-AST بال-CK

390
00:33:38,410 --> 00:33:41,390
بالـ lactate dehydrogenase يبقى أكتر من انزيم

391
00:33:41,390 --> 00:33:44,710
بيرتفع لكن زي ما احنا شايفين أنه عندنا الـkeratin

392
00:33:44,710 --> 00:33:49,230
kinase بيرتفع بشكل كبير وبيصل الارتفاع إلى six

393
00:33:49,230 --> 00:33:54,190
times upper limit normal الارتفاع بيصل إلى ست

394
00:33:54,190 --> 00:34:01,260
أضعاف ال concentration الطبيعيةوالـ CKMP ممكن يصل

395
00:34:01,260 --> 00:34:04,820
الـ Concentration تبعته إلى عشر أضعاف الـ

396
00:34:04,820 --> 00:34:12,680
Concentration الطبيعية الـ

397
00:34:12,680 --> 00:34:19,780
CKS ممكن يظهر أشياء

398
00:34:19,780 --> 00:34:25,260
اللي ممكن نقيسهلأ بنحتاج إلى أكتر من تفاؤل وزي ما

399
00:34:25,260 --> 00:34:31,380
هنشوف فيه أنه تلت تفاؤلات بتصير لغاية ما نصلى a

400
00:34:31,380 --> 00:34:37,160
compound أو product اللي ممكن يتم قياسه وفي هذه

401
00:34:37,160 --> 00:34:41,660
الحالة أن the rate at which not pH is produced is

402
00:34:41,660 --> 00:34:46,100
a function of keratin kinase activity in the first

403
00:34:46,100 --> 00:34:51,200
reaction يبقى هنا أنه not pHهيتكون عندي و نفس

404
00:34:51,200 --> 00:34:55,540
الفكرة لما حكينا عن ال NAD H يبقى ال NAD H و ال

405
00:34:55,540 --> 00:34:59,000
NAD BH اللي هو maximum absorbance على تلات مية و

406
00:34:59,000 --> 00:35:04,180
أربعين بينما ال NAD و ال NADB مالهمش

407
00:35:06,480 --> 00:35:12,140
بتستخدم انزيمات أخرى كالـ Coupled Assay Reaction،

408
00:35:12,140 --> 00:35:17,480
انزيمات الـ Hexokinase والـ G6PD بتم استخدامها

409
00:35:17,480 --> 00:35:23,860
كإنزيمات مساعدةوالـ .. زي ما قلنا إنه إحنا التفاعل

410
00:35:23,860 --> 00:35:28,540
بيمشي بالاتجاهين، عزيزي ما حكينا بأول slide عن الـ

411
00:35:28,540 --> 00:35:32,500
keratin kinase وعادة التفاعل اللي بيتم استخدامه هو

412
00:35:32,500 --> 00:35:36,880
الـ reverse reaction زي ما هو واضح في هذه

413
00:35:36,880 --> 00:35:40,500
المعادلة، يبقى عندنا ال keratin phosphate مع ال

414
00:35:40,500 --> 00:35:43,200
ADP في وجود ال keratin kinase بيعطينا keratin و

415
00:35:43,200 --> 00:35:48,060
ATPالـ ATP اللي بينتج بالتفاعل الأول مع الـ

416
00:35:48,060 --> 00:35:50,680
glucose بيكون موجود بالـ reagent و في وجود الـ

417
00:35:50,680 --> 00:35:56,060
hexokinase بيعطيني ADP و glucose 6-phosphate الـ

418
00:35:56,060 --> 00:35:59,520
glucose 6-phosphate اللي نتجة تهان مع .. طبعا في

419
00:35:59,520 --> 00:36:04,620
وجود الـ 1-NADB و في وجود أنزام G6PD بيعطيني 6

420
00:36:04,620 --> 00:36:11,700
-phosphoglucanate و NADPH و بهذه الحالةالزيادة في

421
00:36:11,700 --> 00:36:18,560
الـ NADPH هو اللي بتم قياسها على 340 نانومتر بيلان

422
00:36:18,560 --> 00:36:24,900
الـ NADPH هان كمية الـ NADPH تعكسلكمية الـ keratin

423
00:36:24,900 --> 00:36:31,630
kinase اللي كان موجود عندى في ال sampleالـ

424
00:36:31,630 --> 00:36:38,430
Reference Interval لـ Total CK في الـ 115 ل160

425
00:36:38,430 --> 00:36:41,410
اللي هو Unit per Liter و International Unit per

426
00:36:41,410 --> 00:36:47,590
Liter على 37 في 115 ل130 و الـ CKMP زي ما اتفقنا

427
00:36:47,590 --> 00:36:52,510
أقل من 6% من الـ Total Keratin Kinase

428
00:36:57,810 --> 00:37:00,470
طيب احنا قولنا انه إذا كان الـ keratin kinase

429
00:37:00,470 --> 00:37:06,050
مرتفع لازم نفحص ال ISO enzymes عشان نشوف إذا كان

430
00:37:06,050 --> 00:37:11,730
المشكلة بالقلب أو لأ و بنستخدم immunoassay بنستخدم

431
00:37:11,730 --> 00:37:16,170
antibodies و ال antibodies هي دي against both the

432
00:37:16,170 --> 00:37:24,470
M and B subunits ال Anti-M inhibits all M activity

433
00:37:24,470 --> 00:37:30,990
but not B activityطبعا يبقى عندى الـ Anti-M

434
00:37:30,990 --> 00:37:37,130
Antibody الموجودة بتعملى Inhibition لـ M Inhibits

435
00:37:37,130 --> 00:37:41,490
all M activity الـ Seeking activity is measured

436
00:37:41,490 --> 00:37:48,470
before and after inhibition activity remaining

437
00:37:48,470 --> 00:37:53,010
after M inhibition is a result of the B subunit of

438
00:37:53,010 --> 00:37:57,430
both MB and BB activity

439
00:38:00,790 --> 00:38:06,930
العمل المجلد بعد الانهيبشان يتم عميله بـ 2 لإعتماد

440
00:38:06,930 --> 00:38:14,430
الـ MB activity يبقى بنضرب 2 عشان نعوض عن الـ 50%

441
00:38:14,430 --> 00:38:19,850
اللي صار لها انهيبشان باستخدامنا لـ Anti-M

442
00:38:23,350 --> 00:38:26,810
المفادة الكبيرة من هذه الطريقة هي أنها تتكتشب

443
00:38:26,810 --> 00:38:29,490
عملية الـBB التي على الرغم من أنها غير ممكن تتكتشب

444
00:38:29,490 --> 00:38:32,850
بشكل عام ستسبب في نتيجة الـMB غير مستقبلية عندما

445
00:38:32,850 --> 00:38:38,050
يتواجد الـBB وهذه هي المفادة الوحيدة يبقى احنا

446
00:38:38,050 --> 00:38:46,750
قولنا انه في عندنا في عندنا في ال sample عندنا

447
00:38:46,750 --> 00:38:47,410
الـMM

448
00:38:49,900 --> 00:38:58,540
وعنا ال م بي وعادة قولنا ال بي بي اللي هو very low

449
00:38:58,540 --> 00:39:03,240
concentration بتكون طيب اللي انا احنا استخدمنا

450
00:39:03,240 --> 00:39:11,900
anti-m antibody بيهدف عمللي inhibition ل ال م CKMM

451
00:39:11,900 --> 00:39:18,380
اتوبوا لبيبتايد صار لهم inhibitionبالـ CKMP الـ

452
00:39:18,380 --> 00:39:25,700
Anti-M عمل انهيبشين لـ M polypeptide طيب و ال B ..

453
00:39:25,700 --> 00:39:32,160
ال B ضلت ال activity بتاعتها موجودة طبعا يبقى ايش

454
00:39:32,160 --> 00:39:38,460
بنعمل بنيجي بنقيس ال activity ل ال sample اللي

455
00:39:38,460 --> 00:39:43,680
عندي أول مرة بدون استخدام ال Anti-M antibody

456
00:39:48,250 --> 00:39:54,710
وتاني قياس بعد ما نستخدم ال antibody اللي هو ال

457
00:39:54,710 --> 00:39:59,950
antiem بأول قياس لل activity بدون إضافة أي

458
00:39:59,950 --> 00:40:04,890
antibodies بعدين بنضيف ال antiem وبنقيس ال

459
00:40:04,890 --> 00:40:13,690
activity مرة أخرى طبعا الان ال residual activity

460
00:40:16,750 --> 00:40:21,490
يبقى زي ما قولنا انه بنقيس ال activity قبل عشان

461
00:40:21,490 --> 00:40:24,170
نشوف في اللي هو ارتفاع في ال CK ولا لأ و بعدين

462
00:40:24,170 --> 00:40:29,770
بنضيف ال anti M اللي هتعمل انهيبشن ل ال M M و

463
00:40:29,770 --> 00:40:34,850
هتعمل انهيبشن ل ال M لكن هيظل ان ال B هو ال active

464
00:40:34,850 --> 00:40:39,210
و على فرض انه هنا ال concentration very very low

465
00:40:39,210 --> 00:40:43,130
تمام يبقى ال activity اللي هتطلع هتكون ال activity

466
00:40:43,130 --> 00:40:47,810
اللي جاية من ال MBتمام ال activity اللي حضل

467
00:40:47,810 --> 00:40:51,990
residual activity after inhibition تمام اللي هي

468
00:40:51,990 --> 00:40:58,170
عبارة عن ال B بنيجي بنضربها باتنين عشان هنعملنا

469
00:40:58,170 --> 00:41:01,770
احنا inhibition لل M و قصنا فقط اللي هو ال B

470
00:41:01,770 --> 00:41:05,630
activity بنضرب باتنين عشان يكون عندنا النتيجة لل B

471
00:41:05,630 --> 00:41:10,450
و النتيجة لل M activity the residual activity

472
00:41:10,450 --> 00:41:13,390
after inhibition is multiplied by two to account

473
00:41:13,390 --> 00:41:19,270
for MB activityزي ما قلنا المشكلة هان ممكن وين

474
00:41:19,270 --> 00:41:25,490
تصير في حال انه كان عندنا ال bb activity موجودة

475
00:41:25,490 --> 00:41:32,150
وعالية هان هيكون في عندنا مشكلة طيب

476
00:41:32,150 --> 00:41:37,010
ممكن ايضا انقيز ال ck-isoenzymes باستخدام ال

477
00:41:37,010 --> 00:41:41,610
electrophoresis و ال electrophoresis تعتبر the

478
00:41:41,610 --> 00:41:46,400
reference method ممكن برضه باستخدامIon Exchange

479
00:41:46,400 --> 00:41:49,540
Chromatography أو ممكن باستخدام Radio Immunoassay

480
00:41:49,540 --> 00:41:53,160
اللي هو باستخدامها الـ Antigen Antibody Reaction

481
00:41:53,160 --> 00:41:59,220
Rapid Assay for CKMP subforms uses high-voltage

482
00:41:59,220 --> 00:42:02,620
electrophoresis on an automated analyzer. The

483
00:42:02,620 --> 00:42:05,520
result will be available in 25 minutes

484
00:42:07,970 --> 00:42:14,430
ويممكن في خلال 25 دقيقة يعطيني يداش نتيجة ال CK ان

485
00:42:14,430 --> 00:42:19,330
بيه زي ما قلنا في حال انه كان عندنا ال CK مرتفع

486
00:42:19,330 --> 00:42:24,410
طبعا الوقت في هذه الحالات مهم جدا عام للوقت في

487
00:42:24,410 --> 00:42:29,350
حالاتالـ Myocardial Infarction مهم جداً وكل ما كان

488
00:42:29,350 --> 00:42:35,010
إنه فحص اللي يعطيني نتيجة بشكل أسرع أكيد هذا هيكون

489
00:42:35,010 --> 00:42:38,290
في مصلحة المريض لأنه لو صار فيه End diagnosis

490
00:42:38,290 --> 00:42:45,550
هيبدأ التدخل العلاجي بشكل مباشر وهذا ممكن يقلل

491
00:42:45,550 --> 00:42:50,030
بشكل كبير من حالات الوفاة