Metilen Mavisiyle Boyama Yöntemi
Bu yöntemde preparatları boyamak için Löffler‟in metilen mavisi solüsyonu kullanılır. Bakterilerin çoğu, bu boyayı yoğun bir şekilde absorbe ettikleri için, bakterilerin görünür hâle gelmeleri kolaylaşır. Bakterilerin kolay boyanmasından dolayı metilen mavisi boyasıyla boyama yöntemi sık kullanılır. Bakteriyolojide gram boyasının bulunmadığı yerlerde metilen mavisi kullanılarak boyama yapılır. Gram boyası kadar etkili olmasa da mikroorganizmaların morfolojisi ve mikroskop sahasında dizilimi göz önüne alınarak ön tanı konulduğu gibi, hangi besiyerine ekim yapılacağı konusunda da bilgi verir.
Metilen mavisi tek başına kullanıldığı gibi diğer boyalarla bir arada da bileşik boya olarak da kullanılır.
Bu boyama yöntemiyle Corynebacterium diphteriae‟nın içinde bulunan ve besin deposu olan metakromatik cisimciklerin (granüllerin) ayrımı difteri hastalığının teşhisi önemlidir. Metilen mavisi, granüllerin görünümünü ortaya koyan en iyi boyadır.
Metakromatik granülleri boyamada kullanılan diğer bir yöntem de neisser boyama yöntemidir
Metilen mavisi ile boyamada sırasıyla aşağıdaki işlemler yapılır.
- Preparat hazırlanır, kurutulur ve tespit edilir.
- Preparatın üzerine, metilen mavisi solüsyonu konarak beklenir.
- Su ile yıkanır, kurutulur.
- İmmersiyon objektifi ile incelenen preparatta, basiller açık mavi, granüller ise koyu mavi renkte görünür.
Neisser boyama yöntemi ile boyamada sırasıyla aşağıdaki işlemler yapılır.
- Tespit edilen preparat üzerine neisser A-B solüsyonundan damlatılır, 2 dakika bekletilir.
- Boya dökülüp yıkanmadan kurutma kâğıdıyla kurutulur.
- Krisoidin boyasıyla 10 saniye boyanır.
- Yıkamadan kurulanır.
- İmmersiyon objektifi ile incelenen preparatta, basiller açık mavi, granüller ise koyu mavi renkte görünür.
Kaynak:
T.C. Milli Eğitim Bakanlığı Tıbbı Laboratuvar Mirobiyolojik Preparat Hazırlama 2011 Ankara http://megep.meb.gov.tr