DNA için Feulgen reaksiyonu
DNA için en güvenilir ve en spesifik tekniktir. Reaksiyon, asit hidroliz ile purin-deoksiriboz bağlarının kırılması ile aktif aldehit gruplarının serbest kalması esasına dayanmaktadır. Aldehitler, Schiff reaktifini (leucofuksin, fuksin sülforoz asidi) tekrar renklendirerek, çekirdek kromatinine mor-menekşe renk verir. Bu reaksiyon, PAS reaksiyonunun analogudur.
Fiksasyon için Bouin, aşırı hidrolize neden olduğundan tavsiye edilmez. Diğer fiksatiflerin çoğu kullanılabilir fakat asit hidrolizin optimum süresi fiksatife göre değişmektedir. Fiksatifin penetrasyon hızı Feulgen reaksiyonunun yoğunluğunu etkiliyebilir.
Hidroliz ise 1 N HCl ile 60 0C’de yapılır. Birçok alternatif hidrolize edici ajanlar kullanılabilir. Hidroliz, nükleik asitlerde 2 farklı değişikliğe neden olmaktadır. Purin bazlar hızla uzaklaşır ve deoksiribozun aldehit grupları açığa çıkar. Bu istenen bir harekettir fakat aynı zamanda bazik protein ve nükleik asitler kromozomlardan uzaklaştırılır. Yetersiz hidroliz, zayıf bir Feulgen reaksiyonu verirken aşırı hidroliz ise negatif sonuçlara yol açmaktadır. Pratikte kesitleri farklı hidroliz sürelerine maruz bırakarak optimal zamanın tayin edilmesi iyi sonuçlar vermektedir.
Yöntemler
A-DNA için Feulgen reaksiyonu
DNA morumsu - kırmızı
Sitoplazma yeşil
B-DNA için naphtoik asit hidrazit-Feulgen reaksiyonu
DNA mavimsi – menekşe
Sitoplazma ve diğer proteinler pembemsi – kırmızı