Bakteriyel Endotoksinler Testi (BET), gram negatif bakterilerin hücre duvarının bir bileşeni olan bakteriyel endotoksinlerin saptanması ve nicelleştirilmesi için in vitro bir tahlildir. BET, kardiyovasküler sistem, lenfatik sistem veya beyin omurilik sıvısı ile doğrudan veya dolaylı teması olan tıbbi cihazlar için parti salım testinin bir parçası olarak gerçekleştirilir. Enjekte edilebilir farmasötik ürünler ayrıca bakteriyel endotoksinler için test edilmelidir. Su sistemlerinin ve gelen malzemelerin rutin olarak izlenmesi, sürecin nihai ürüne endotoksin katkısı olmadığından emin olabilir.
Bu deney aynı zamanda Limulus Amebosit Lizat (LAL) testi olarak da bilinir ve bazen pirojen testi olarak da adlandırılır (çünkü bakteriyel endotoksinler insanlar dahil memelilerde ateşe neden olabilir). Ancak BET, USP bölüm <151> 'de açıklanan tavşan pirojen testi ile karıştırılmamalıdır.
Tüm testler USP bölüm <85>, USP bölüm <161>, ANSI / AAMI ST72: 2011, EP 2.6.14, JP 4.01 ve Endüstri Pirojen ve Endotoksin Testi için FDA Kılavuzu: Sorular ve Cevaplar bölümünde belirtilen gereksinimleri karşılar.
EUROLAB, bakteriyel endotoksin testlerinde endüstri lideridir. Rutin testler için, sonuçlar tipik olarak numune alındıktan sonraki dört iş günü içinde tamamlanır. Doğrulamalarımız ve yöntem geliştirme çalışmalarımız, etkili ve uyumlu olduğu kanıtlanmış bir süreçle ayrıntılı olarak yapılır. 25 yılı aşkın tecrübemizle, test kriterleri ile ilgili sorularınızı çözmekten memnuniyet duyarız ve ayrıca arıza araştırmaları ve üretim sürecinin değerlendirilmesinde de yardımcı olabiliriz.
Bakteriyel Endotoksinler testi kinetik türbidimetrik, kinetik kromojenik veya jel pıhtı test yöntemleri ile yapılabilir. Bununla birlikte, kinetik test yöntemlerinin jel pıhtı testine göre önemli avantajları vardır.
Örnek ekstraksiyonları: Cihaz ekstraksiyonları, saptanabilir endotoksin içermeyen su kullanılarak yapılır. Ekstraksiyon işlemi, cihazı uygun şekilde çıkarmak için cihazların minimum miktarda sıvı ile yıkanmasını ve / veya yıkanmasını içerir. Pirojenik olmayan bir sıvı yoluna sahip cihazlar, ilgili sıvı yolunun, 37 ± 1 ° C'ye ısıtılmış ekstraksiyon sıvısı ile yıkanması ve temasın bir saatten az olmamak üzere çıkarılmasıyla çıkarılır. Cihazın daldırılması, cihazların bir orbital çalkalayıcıda aralıklı girdap ile 60 dakikadan fazla bir süre boyunca 37-40 ° C'de ekstraksiyon sıvısında yıkanmasıyla gerçekleştirilir.
Test prosedürü: Bir BET, sıvı numunenin veya numune ekstraktının Limulus Amebosit Lizat (LAL) kullanılarak analiz edilmesini içerir. LAL, at nalı yengecinin kanından yapılmış bir reaktiftir. Bakteriyel endotoksinlerin varlığında lizat, bir pıhtı oluşturmak için reaksiyona girer veya tekniğe bağlı olarak bir renk değişikliğine neden olur. Test örneği, bilinen endotoksin konsantrasyonlarından yapılan standart bir eğri ile karşılaştırılır. Tüm testler en az iki kez yapılır. Pozitif ürün kontrolü ve negatif kontrol her testin bir parçası olarak dahil edilir.
Validasyon: Test numunesinin endotoksinleri tespit etme yeteneğine müdahale etmediğini göstermek gerekir. Bu, kinetik test yöntemleri için pozitif ürün kontrolü (ayrıca spike geri kazanımı olarak da bilinir) ve jel pıhtı yöntemi için ayrı bir inhibisyon ve geliştirme deneyi ile gerçekleştirilir.
Su dışında bir çözücü içinde sulandırma, ısı denatüre etme, santrifüjleme veya filtrasyon gibi bir işlem gerektiren numuneler, tedavinin endotoksin kaybıyla sonuçlanmadığını göstermek için valide edilmelidir. Bu, numunenin endotoksinlerle aşılanması ve aşılanan örneğin seçilen tedaviye tabi tutulmasıyla gerçekleştirilir.
Tıbbi cihazlar için endotoksin limiti, cihazın beyin omurilik sıvısı ile temas etmemesi halinde 20.0 AB / cihazdan fazla değildir, bu durumda sınır 2.15 AB / cihazdır. Oftalmik implantlar ve OVD'lerin 0.2 AB / cihaz veya 0.2 AB / mL'lik bir alt limiti karşılaması gerekebilir. Farmasötik ürünler için endotoksin sınırları, 1 saatlik bir sürede uygulanabilecek maksimum doza dayanmaktadır.
EUROLAB, konusunda son derece uzman ekibiyle ve uluslararası akredite laboratuvarlarıyla birlikte, Bakteriyel Endotoksin Testi kapsamında tüm test, analiz, ölçüm, değerlendirme ve rapor oluşturma hizmetlerini eksiksiz ve güvenilir bir şekilde gerçekleştirir.