Fiksasyon – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Fiksasyondan Önce Dokuların Tutulması
Fiksasyondan önce örnekleme ve doku işleme süreçleri, iyi seçilmiş ve iyi korunmuş doku elde etmek için çok önemli olabilir. Yapısal korumanın kalitesiyle yorumlama büyük ölçüde kolaylaştırıldığından, bu çok önemlidir. Glutaraldehit veya hatta tamponlu histolojik formalin kullanımının istenmesine rağmen, bazen mum bloğundan dokunun alınması gerekir.
Bazı yoğun teşhis kurumlarında her şeyi balmumuna bloke etmek rutin bir politikadır ve bu özellikle ışık mikroskobu incelemesinden ödün vermemek için EM için numune almamanın özellikle uygun olduğu küçük numuneler için geçerlidir.
Sıcak ksilen ve mumun oldukça acımasız rejimi kaçınılmaz olarak bazı ince yapılara zarar verir, ancak bazı hücre bileşenleri mum desmozomları, tonofibriller, miyofilamentler, ara filamentler, lümina, Birbeck granülleri, nöroendokrin granülleri ve melanozomlardan kurtulabilir.
Düzgün endoplazmik retikulum ve mitokondri gibi bazı tamamen membranöz yapılar genellikle zayıf bir şekilde korunur, ancak bazı plazma membranları iyi korunabilir veya tasvir edilebilir ve bu nedenle tanınabilir.
Balmumundan geri kazanımın bir varyasyonu, bir H&E bölümünün elektron mikroskobu için işlenebildiği ve ozmike edilebildiği, kurutulduğu ve cam slayt üzerine reçine ile infiltre edilebildiği “pop-off” yöntemidir. Kesit, daha sonra ultra ince bölümleme için geleneksel bir epoksi reçine kalıbına “atılabilir”. Bu teknik aynı zamanda lekelere de uygulanabilir, ancak teknik olarak zordur.
Kriyoprezervatif ajanlar olmadan kurutulan veya dondurulan veya fiksasyondan bir gece önce bırakılan dokuların EM için yararsız olması beklenebilir.
Bununla birlikte, dondurulan ve sonra çözülen kriyoprotektif doku, iyi ultrastrüktürel sonuçlar verebilir. Diğer birçok örnek glutaraldehit içinde sabitlenebilir veya sabitlenmesi gerekir.
Periferik kan, meni, nazal ve bronşiyal fırçalamalardan elde edilen buffy coat ve bir şırıngadaki ince iğne aspirasyon numunesinde görülebilen küçük doku parçaları, prosedür açısından glutaraldehitte olduğu kadar kolay sabitlenir. formalin.
Bazı örneklerin sabitlenmesine gerek yoktur. Trombosit disfonksiyonunu içeren karmaşık bir durum olan Hermansky-Pudlak sendromu, trombosit preparatını film kaplı bir ızgarada kurutarak ve farklı granüller ve anormal granül sayısı için doğrudan elektron mikroskobunda incelenerek gösterilebilir.
Fiksasyon Ne demek
Azot fiksasyon ne demek
CO2 fiksasyonu
Fiksasyon Nedir dış
Azot fiksasyonu
Kontrast fiksasyonu ne demek
Alkol fiksasyonu
Görsel fiksasyon Ne demek
Ultra İnce Bölümleri İncelemeye Yönelik Ön Bilgiler
Katı doku histopatolojisinde, EM nadiren diğer tanısal bilgi kaynaklarından izole olarak gerçekleştirilir. Patoloğun tüm uygun klinik bilgilere sahip olması, lezyonun ayrıntılı histolojik görünümünü bilmesi ve tümörler söz konusu olduğunda, EM gerçekleştirildiğinde genellikle immünohistokimyasal bulgulara sahip olması gerekir.
Gereksiz immün lekeleri ortadan kaldırmak için immünohistokimyadan önce EM yapma fikri potansiyel olarak yararlı ve tartışmalı bir şekilde mantıklıdır, ancak popüler hale gelmemiş gibi görünmektedir.
“Yarı ince” kesitlerin kesilmesiyle ultramikrotomiden önce gelmek olağandır. Bunlar genellikle 1-2 mm kalınlığındadır, toluidin mavisi veya benzer bir lekeyle boyanır ve ışık mikroskobunda incelenir.
Dokunun H&E bölümünde görülenle karşılaştırılabilir morfolojiye sahip olduğuna veya katı doku muadilinin H&E’sinin olmadığı durumlarda klinik arka plana göre beklenen hücrelerin mevcut olduğuna dair doğrulama sağlarlar (örn. vücut sıvısı örneği).
Bu prosedürle, genellikle tümörlerde bulunan istenmeyen kollajen veya nekroz odaklarından kaçınılabilir. Son olarak, yarı ince kesitler doku korumasının kalitesi hakkında bilgi sağlayabilir. Soluk lekeli hücreler ve çekirdekler genellikle iyi korumayı gösterirken, net iç kısımlara sahip keskin şekilde çizilen çekirdekler genellikle zayıf korumayı gösterir.
Bir tümörün araştırılmasında, bu nedenle, birkaç bloktan yarı ince kesitler kesilmeli ve tümör hücresi içeriği ve koruma kalitesine göre en uygun olanı seçilmelidir. Karmaşık lezyonlarda, histolojik olarak farklı alanların tümünü temsil eden bloklardan ultra ince kesitlerin kesilmesi arzu edilir.
Patolog veya bilim adamı, ultramikrotomi için uygun seçimi sağladıktan sonra, belirli koşullar için karakteristik veya spesifik olarak kabul edilen hücre yapıları veya matris bileşenleri için ultra ince bölümleri inceler.
Bu yapıların tanımlanması, hücre ve doku ince yapısının ayrıntılı bir yorumlama bilgisine ve belirli hastalıkların ultrastrüktürel özelliklerine ilişkin bilgiye dayanır: bu, birkaç yıl boyunca birikme eğiliminde olan bir uzmanlıktır.
Örneğin Birleşik Krallık’ta klinik bilimcilerin veya biyomedikal bilim adamlarının ultra ince bölümleri patologların talimatı altında inceledikleri yerlerde, bu taraflar arasında yakın ilişki ve iletişim çok önemlidir. Örneğin, karmaşık bir tümörün incelenmesinde, immün boyalar mevcut olmaya devam ettikçe tanı fikirleri birkaç gün içinde değişebilir.
Transmisyon Elektron Mikroskobu Uygulamaları
Tümörler
Tümör teşhisinde, belirli bir tümörün başarılı bir şekilde karakterize edilmesi, ayırt edici hücre ve / veya matriks yapılarının bulunmasına bağlıdır. Bunlar, “normal hücresel karşı kısım” da bulunanlarla aynı kabul edilir.
Bu nedenle, örneğin, normal enteroendokrin hücrelerde bulunan nöroendokrin granüller, desmozomlar tarafından meme karsinomu, tonofibriller, bazal lamina, lümina ve mucigen granülleri, normal meme epitelinde olduğu gibi ve melanozomların karakteristiğini bularak malign melanom, bir intestinal karsinoid teşhisi konabilir. normal melanositlerin.
Bu, bu tümörlerin bu farklılaşmış normal hücrelerden kaynaklandığı anlamına gelmez; daha ziyade, daha öncelikli olarak farklılaşmış kök hücrelerden kaynaklandıkları düşünülmektedir. Çok çeşitli tümörler, ayırt edici veya spesifik üst yapılarına göre tanımlanabilir. Tümör teşhisinde faydalı özel organel örnekleri gösterilmektedir.
Tümörlerin ultrastrüktürel tanısında tuzaklar vardır. Açıktır ki, birçok tümör daha az farklılaştıkça beklenen özelliklerini kaybeder. Tipik bir inceleme protokolü, bir bloğu (ultra ince bölümlerden oluşan bir ızgara) 1 saat boyunca dikkatle incelemektir.
Bununla birlikte, azalan farklılaşma seviyelerine sahip tümörler, patoloğun tanısal sonucun klinik ihtiyacına ilişkin algısına bağlı olarak, birkaç saat daha kapsamlı bir araştırma ve birden çok bloğa ihtiyaç duyabilir.
Diğer bir komplikasyon olarak, tümörler ayrıca beklenmedik özellikler ifade edebilir ve bu nedenle “ıraksak” veya “anormal” farklılaşma gösterebilir. Teşhis uzmanının, bu nedenle, kişisel deneyimlerden ve literatürden bu tümör özellikleri hakkında bilgi sahibi olması gerekir.