Dondurarak kurutma olarak da bilinen liyofilizasyon, biyolojik materyali uzaklaştırmak için biyolojik materyali korumak için kullanılan bir işlemdir. önce numunenin dondurulmasını ve daha sonra vakum altında çok düşük bir sıcaklıkta kurutulmasını içeren numuneden su sıcaklıklar. Liyofilize örnekler, işlenmemiş örneklerden çok daha uzun süre saklanabilir.
Liyofilizasyon Neden Kullanılır?
Liyofilizasyon veya bakteri kültürlerinin dondurarak kurutulması, numuneleri tam olarak kurutmaktan kaynaklanabilecek zararı en aza indirirken, kültürleri uzun süreli saklama için stabilize eder. Birçok mikroorganizma, liyofilize edildiğinde iyi bir şekilde hayatta kalır ve uzun bir süre depolandıktan sonra kültür ortamında kolayca rehidre edilebilir ve büyütülebilir.
Liyofilizasyon ayrıca biyoteknoloji ve aşıları, kan örneklerini korumak için biyomedikal endüstrileri, saflaştırılmış proteinlerve diğer biyolojik maddeler.
Bu kısa laboratuvar prosedürü, kültür koleksiyonunuzu korumak için piyasada bulunan herhangi bir dondurucu kurutucu ile kullanılabilir.
Süreç
Liyofilizasyon süreci aslında yüceltme adı verilen fiziksel bir fenomenin bir uygulamasıdır: bir maddenin önce sıvıdan geçmeden katıdan gaz haline geçişi evre. Liyofilizasyon sırasında dondurulmuş örnekteki su, önce numuneyi çözmeden su buharı olarak çıkarılır.
Yaygın hatalar
Liyofilizasyon söz konusu olduğunda en yaygın hatalardan biri, numunenizin erime noktasını bilmemek, bu da doğru liyofilizatörü seçmeyi zorlaştırır. İşlem sırasında numuneleriniz eriyebilir. Bir başka yaygın hata, raf tipi bir dondurucu kurutucuda dondurarak kurutma yaparken daha soğuk olduğunu düşünmektir. Birincil kurutma sırasında, raf sıcaklığını numunenin ötektik sıcaklığının hemen altına ayarlamanız gerekir. Numune moleküllerini hareket etmeye teşvik etmek için yeterli ısı olmalıdır - ancak erimeyi önleyin.
Üçüncü bir hata, örnekleriniz için yanlış ekipman kullanmaktır. Dondurucu kurutucular bir grup ortamında kullanıldığından, bir tane satın almadan önce aşağıdakileri bilmelisiniz:
- Ne kadar nem liyofilize edilecek
- Numune nedir (ve ötektik sıcaklık)
- Dondurucu kurutucu nasıl kullanılır
Ünite doğru kullanılmazsa, tüm numuneleri bozabilir. Bu da bizi sık karşılaşılan bir hataya daha getiriyor: Vakum pompasının bakımını yapmamak. Liyofilizasyonun çalışması için pompa mükemmel çalışır durumda olmalıdır. Dondurarak kurutma işleminden 30 dakika önce ve sonra pompanın gaz balastı açık olarak çalıştırılması pompanın ömrünü uzatacaktır. Gaz balastının açılması, iç bileşenlerin hasar görmesini önlemek için kirletici maddeleri pompadan temizler. Pompa yağını sık sık renk değişikliği ve parçacıklar açısından kontrol etmeli ve yağı gerektiği gibi değiştirmelisiniz. Düzenli yağ değişiklikleri, dondurarak kurutma işlemi sırasında pompanın optimum vakumda çekilmesini sağlar.
Son olarak, liyofilizasyon işleminiz için yanlış dondurarak kurutma aksesuarlarına sahip olmak da büyük bir hata olabilir. Vakumunuzun altında bir durdurucu örneğine mi ihtiyacınız var? Ardından bir durdurma odası gerekir. Şişelerde dondurarak kurutma yapıyor musunuz? Ardından bağlantı noktaları olan bir kurutma bölmesine sahip olduğunuzdan emin olun.
Yukarıdaki hatalardan kaçınarak, dondurarak kurutma makinenize ve pompanıza daha iyi bakım sağlayabilir ve dondurarak kurutma işlemi yapıldığında daha iyi örneklere sahip olabilirsiniz.
Referanslar
Labconco Haberleri. "Liyofilizasyon sürecinde yapılan ilk 5 hata."