Yeni hayvan modellerinin geliştirilmesine yönelik araştırmalar, devam eden koronavirüs hastalığı 2019 (COVID-19) pandemisi bağlamında ilaç ve aşı adaylarını test etmek için önemlidir. Şiddetli akut solunum sendromu koronavirüs 2 (SARS-CoV-2) nedeniyle enfeksiyon ve ölümlerde azalmayla sonuçlanan birinci nesil aşılar dünyanın birçok ülkesinde kullanıma sunulurken, bazı aksaklıklar da belirgin hale geliyor.
Yakın zamanda yayınlanan yeni bir ön baskı bioRxiv* sunucu, farelerde ciddi hastalığa neden olacak şekilde uyarlanmış bir virüs formuna karşı yeni bir adenovirüs SARS-CoV-2 aşı adayının immünojenisitesini ve koruyucu potansiyelini açıklar. Bulgular, bunun, mevcut rhesus adenovirüs aşı adayı RhAd52’nin koruyucu etkinliğini göstermenin yanı sıra, yeni aşıların incelenmesi için yararlı bir fare modeli sağladığını göstermektedir.
Arka fon
SARS-CoV-2 enfeksiyonunun araştırılmasına yönelik önceki hayvan modelleri, insan anjiyotensin dönüştürücü enzim 2’yi (hACE2) eksprese eden transgenik fareleri, hamsterleri ve insan olmayan primatları içeriyordu. Bu modeller viral replikasyona ve bir dereceye kadar klinik hastalığa izin verir.
Fareye uyarlanmış virüs (MA10), laboratuvar farelerinin virüsle enfekte olmasına ve insan COVID-19’un temel özelliklerini, özellikle de solunum yollarında viral replikasyon ve önemli kilo kaybı geliştirmesine izin vermek için geliştirildi. Bu model kullanılarak, küçük moleküller, antiviral potansiyellerinin yanı sıra prototip monoklonal antikorlar ve aşı adayları için test edilmiştir.
Tek doza karşı güçlü bağışıklık tepkisi
Bu çalışmada, bilim adamları RhAd52 vektörlü SARS-CoV-2 kullanımına karşı bağışıklık tepkilerini araştırdı. başak proteini. Bu virüse karşı antikorlar, Oxford AstraZeneca aşısında kullanılan Ad26 vektörüne kıyasla insanlarda çok daha düşük prevalansta bulunur.
Bilim adamları, örneğin yalnızca S1 alanı, reseptör bağlama alanı (RBD) veya sivri ucun sitoplazmik kuyruk olmadan kesilmiş kısımları dahil olmak üzere başak proteininin çeşitli biçimlerini kullandılar. Furin bölünme bölgesi mutantları gibi bir çift prolin (S2P) içeren stabilize edilmiş ön füzyon sivri konformasyonları kullanıldı.
RhAd52 aşılarının bir hazırlama dozu ile bağışıklanmış fareler, 8. haftaya kadar tüm vakalarda spesifik antikorlar geliştirdiler. Nötralize edici tepkiler, bir doz S1 insert içeren aşı ile en zayıftı, bazı fareler saptanabilir nötralize edici tepkiler gösteremedi.
psödovirüs enfeksiyon, bu aşı adaylarının birçoğu tarafından nötralize edildi, yine en zayıf performans S1 alanına dayalı olanlaydı.
İki doz ile antikor titresinde on kat artış
Takviye dozundan sonra, 8. haftada, anti-spike antikorları, aşı antijeninden bağımsız olarak iki hafta içinde on kat arttı. Böylece, bir prime-boost aşı rejiminin, bu aşı adayı ile bağışıklığı indüklemede etkili olduğu kanıtlanmıştır.
Birkaç tip aşı rejimi karşılaştırıldığında, tüm bağışıklı hayvanlar, ilk dozdan 12. haftada sivri uç ve RBD’ye güçlü bağlayıcı antikor tepkileri gösterdi.
Yine, prime-boost rejimi, tek bir doza göre yaklaşık bir log daha yüksek medyan antikor titreleri gösterdi, ancak en düşük yanıt S1 antijeni ile oldu. S1 bazlı aşı dışındaki tüm aşılar için yüksek nötralize edici tepkiler de bulundu.
Akciğer dokusunda viral yükün azaltılması
İmmünize edilmiş fareler, intranazal olarak uygulandığında MA10 virüsüne karşı korunmuştur. Kontroller yaklaşık %15’lik (ortanca) dramatik bir kilo kaybı gösterirken, aşılanmış fareler göstermedi, ağırlıkları tüm antijenler ve her iki doz rejimi (tek veya iki doz) ile sabit kaldı.
Kontrol farelerinde, doğal veya S2P formunda RhAd52-vektörlü tam uzunlukta sivri uçla bağışıklaştırılan farelerde bu tür parçacıkların geri kazanılamamasıyla karşılaştırıldığında, solunum yolu dokularında altı log daha yüksek konsantrasyonlarda bulaşıcı virüs parçacıkları bulundu. veya tepesi kesik antijenler.
Plak oluşumu açısından, eski grubun medyan titresi 3,1 x 10’du.7 ikincisinde <100/akciğer ile karşılaştırıldığında plak oluşturan birimler (PFU)/akciğer.
En etkili aşı, akciğer dokusunda saptanabilir viral yük olmaksızın tüm fareleri tamamen koruyan RhAd52.S2P aşısıydı. Bu, insan olmayan primatlarda S2P antijeni ile ilgili daha önceki bulguları doğrular ve bu nedenle şu anda klinik deneylerden geçmektedir.
S1 ve RBD antijeni içeren aşılar, enfeksiyöz virüsün varlığına neden oldu, ancak medyan 3,9 x 10 olmak üzere daha düşük titrelerde5 ve 5.0×103 Sırasıyla PFU/akciğer. Bu nedenle, bunlar, tam uzunlukta sivri veya tepesi budanmış sivri uçlu aşıların tek dozlarında olduğu gibi yalnızca kısmi koruma sağladı.
Viral yükler 2. günden itibaren (7. güne kadar) azalmaya devam eder. İki doz RhAd52.S ve RhAd52.S1 aşıları ile bağışıklaştırılan bazı fareler dışında, virüs yükleri 4. günde saptanamadı.
Birlikte, bu veriler, tüm aşıların, enfeksiyonun tipik zirvesinde solunum yolu doku viral yüklerinde bir azalmaya yol açtığını ve ayrıca virüsün akciğerlerde kalıcılığını önemli ölçüde azalttığını göstermektedir.”diyor ekip.
Pik antikor titreleri ne kadar yüksek olursa, akciğerlerdeki PFU titresi o kadar düşük olur, bu da aşının neden olduğu etkili bir bağışıklık tepkisinin virüsü solunum yolunda başarılı bir şekilde nötralize ettiğini gösterir.
Etkileri nelerdir?
Bu çalışmanın bulguları, RhAd52 vektörünün güçlü bir bağlanma ortaya çıkarma vaadini göstermektedir ve nötralize edici antikor farelerde yanıt, onları SARS-CoV-2 enfeksiyonuna karşı korur. Bu vektör virüsünün insanlarda düşük seroprevalansı vardır, bu da birincil ikinci nesil aşılar veya güçlendiriciler olarak etkili COVID-19 aşılarının geliştirilmesi potansiyelini gösterir.
İkinci olarak, MA10 fareye uyarlanmış SARS-CoV-2, farelerde ciddi hastalık üretti ve solunum yollarında da başarılı bir şekilde kopyalandı.
Fareler ideal küçük hayvan modelleridir, büyük ölçekte bulunurlar, uysaldırlar ve kısa bir yaşam döngüsüne sahiptirler. MA10 enfeksiyonunu takiben şiddetli hastalığın başarılı bir şekilde kurulması, onu insan olmayan primat modelleri yalnızca hafif hastalık geliştirdiğinden şiddetle ihtiyaç duyulan insan COVID-19 için uygun bir model haline getirir.
Bu model daha önce antiviralleri test etmek için kullanılmıştı, ancak bu, aşı prototiplerine hümoral bağışıklık tepkisini incelemede faydasını gösteriyor. Bir dizi antijenin kullanılması, viral replikasyonun tamamen baskılanmasını sağlamak için doğru rejimi ve antijeni seçmenin ne kadar önemli olduğunu gösterir.
Bu veriler, RhAd52 aşılarının geliştirilmesini ve yeni aşı adaylarını taramak ve vahşi tip farelerde SARS-CoV-2 tehdidine karşı korumanın altını çizen immünolojik mekanizmaları incelemek için MA10 meydan okuma virüsünün kullanımını desteklemektedir.”, ekibi bitiriyor.
*Önemli Uyarı
bioRxiv hakemli olmayan ön bilimsel raporlar yayınlar ve bu nedenle kesin olarak kabul edilmemeli, klinik uygulamaya/sağlıkla ilgili davranışlara rehberlik etmemelidir veya yerleşik bilgi olarak ele alınmamalıdır.
.
news-medical.net
Source link