... konulu sunumlar: "Doç.Dr. Mustafa ALTINIŞIK ADÜTF Biyokimya AD AYDIN, 2007"— Sunum transkripti:
1Doç.Dr. Mustafa ALTINIŞIK ADÜTF Biyokimya AD AYDIN, 2007 İdrar SedimentiDoç.Dr. Mustafa ALTINIŞIKADÜTF Biyokimya ADAYDIN, 2007
2İdrar sedimentiBir santrifüj tüpüne konan idrar devir/dakikalık santrifüjde 3-5 dakika santrifüj edildiğinde tüpün dibinde oluşan çökeltidir.
3İdrar sedimentinin incelenmesi için, bir santrifüj tüpüne idrar numunesinden bir miktar konur. İdrar sedimentinin incelenmesi için en uygun örnek sabah ilk idrardır ve idrar örneğinin alındıktan sonra ilk yarım saatte incelenmesi idealdir. Asit reaksiyonlu olmak koşuluyla buzdolabında sediment içeriği korunabilir.
4İdrarın konduğu santrifüj tüpü, bir başka tüple dengelenerek santrifüj aletine konur ve dakikada devirde 3-5 dakika santrifüj edilir.
5İdrar tüpü santrifüjden alınır ve aşağıya doğru 45o eğilerek içindeki berrak idrar, başka analizler için başka tüplere alınır veya dökülür.Santrifüj tüpünün dibindeki çökelti yeniden çalkalanarak süspansiyon haline getirilir ve bu süspansiyondan 1 damla bir lam üzerine alınır.
6Lamdaki damla, kenarlardan taşmayacak ve hava kabarcığı da kalmayacak şekilde bir lamelle kapatılır. Böylece hazırlanan preparat, mikroskopta incelenir.
7İdrar sedimenti preparatı incelenirken, önce mikroskopun küçük objektifi (10X) ile 100 defa büyütülerek bütün alanlar kontrol edilir.Sonra şekilli elemanların bol olduğu yerler büyük objektif (40X) ile 400 defa büyütülerek incelenir.Direkt, fakat parlak olmayan ışıkta şekilli elemanlar daha iyi görülür; genellikle kondensatör uzaklaştırılır veya diyafram kısılır.
8İdrar sedimentinde görülebilecek şekilli elemanlar; eritrositler,lökositler,epitel hücreleri,silendirler,kristaller,bakteri, mantar ve parazit hücreleridirler.Bunlar, çeşitli özellikleriyle tanınırlar.
12İdrar sedimentini incelemenin sonucu, 400 defa büyütmede 20 mikroskopik alanda rastlanan şekilli elemanların ortalamasına göre rapor edilir:0-2 şekilli eleman nadir;2-4 şekilli eleman tek tük;5-20 şekilli eleman sayısıyla;50’den fazla şekilli eleman bol olarak ifade edilir.
13İdrar sedimentinde eritrositler Lökositlere göre daha küçük, iyi korunmuşlarsa açık yeşilimtrak renkte ve yuvarlak görülürler. Dikine duran eritrositler bisküvi şeklinde görülürler.
14Mikrovida hafifçe oynatıldığında eritrositlerde iç içe iki halka saptanabilir
15Hipotonik idrarda eritrositler şişerler ve renklerini kaybederler; güç görülen yuvarlak gölgeler şeklinde seçilirler; eritrositlerde çift halka saptanmaz.Konsantre idrarda eritrositler büzüşmüş, orak şeklinde görülebilirler.
16İdrar sedimentinde eritrositler, mantar hücreleri, ürat kristalleri, yağ damlaları ile karıştırılırlar.Ayırıcı tanıda mantar hücrelerinin genellikle zincir oluşturmaları ve %3’lük asetik asitte erimemeleri; ürat kristallerinin koyu kahverengi ve çeşitli büyüklükte olmaları; yağ damlalarının çeşitli büyüklükte ve genellikle oval olup ışığı şiddetle kırmaları önemlidir.
17Normalde idrar sedimentinde eritrosit, erkek idrarında görülmez,kadın idrarında her mikroskop sahasında 0-2 olabilir.İdrar sedimentinde eritrositlerin artması hematüri olarak tanımlanır.Hematüri, renal hastalıklarda, üriner traktüs hastalıklarında ve ekstrarenal hastalıklarda görülebilir.
18İdrar sedimentinde lökositler Eritrositlere göre daha büyük ve granüllüdürler; görünümleri, idrar pH’ına göre değişir.
19Lökositler,asit veya hafif alkali idrarda granüllü bir sitoplazma ve belirgin renksiz bir çekirdek içeren yuvarlak, büyük hücrelerdir;alkali idrarda ise şeffaf, sınırları kaybolmuş bir sitoplazma ve belirgin olmayan çekirdek içeren şişmiş, büyük hücrelerdir.
20İdrar sedimentindeki lökositler, % 3’lük asetik asitten 1 damla lamelin kenarına damlatıldığında daha belirgin olurlar.Asetik asit, sitoplazmadaki küçük granüllerin yok olmasını, fakat lökosit çekirdeğinin belirgin görülmesini sağlar.
21Normalde idrar sedimentinde lökosit, her mikroskop sahasında erkekte nadir, kadında tek tük olabilir.İdrarda devamlı olarak fazla sayıda lökosit çıkması piyüri olarak tanımlanır.İdrar sedimentinde bol lökosit olması halinde, asit ve nötral idrarlarda beyaz bir çökelti gözlenir. Alkali idrarlarda bulanık bir boyanmış sediment görünümü gözlenir.
22Piyüri, nefritte, piyelonefritte, idrar yolu iltihaplarında görülür. İdrar sedimentinde görülen lökositlerin biraraya gelerek küme oluşturup oluşturmadıkları da araştırılır ve lökosit kümeleri görülürse, bunlar da değerlendirme sonuç raporunda belirtilir.
23İdrar sedimentinde epitel hücreleri Yassı epitel hücreleri, idrar yolları epiteli hücreleri, böbrek epiteli hücreleri gibi çeşitli olabilir
24Yassı epitel hücreleri, küçük çekirdekli, yassı veya poligonal, idrar sedimentindeki en büyük hücrelerdir; genellikle kenarları katlanmış görünümdedirler. Bazen birbirine bağlı olarak birkaç hücre bir arada bulunabilir.
25İdrar yolları epiteli hücrelerinden üst kat hücreleri, küçük yassı epitel hücrelerine benzerler; orta kat hücreleri, genellikle armut veya iğ şeklinde görülürler; en alt tabaka hücreleri, yuvarlak, nispeten küçük çekirdekli hücrelerdir.
26Böbrek epiteli hücreleri, büyük bir damla şeklinde çekirdekleri olan yuvarlak veya poligonal hücrelerdir; genellikle yağ damlacıkları içeren bir sitoplazmaları vardır; bazen küme, bazen de zincir şeklinde sıralanan hücre toplulukları halinde görülürler.
27Epitel hücreleri, kadın idrarında biraz daha fazla sayıda olabilirler ki bunlar genellikle vajina, üretra veya mesane kökenlidir.Böbrek epiteli hücreleri normal idrarlarda görülmez.
28İdrar sedimentinde silendirler Renal distal tübülüs boşluğu içinde hücre, hücresel kalıntılar ve proteinlerin birikmesiyle oluşmuş, çeşitli uzunlukta ve oluştuğu tübülüsün çapına uygun kalınlıkta silindir şeklinde elemanlardır.Keskin sınırlı, yuvarlak veya künt uçludurlar; düz veya eğri, nadiren köşeli veya spiral şekilli olabilirler.
30Silendirler, özellikle lamelin kenarlarında ve küçük büyütme ile aranmalı ve sonra büyük büyütme ile incelenmelidirler.Silendirler düşük dansiteli, alkali ve uzun süre bekleyerek bakteri üremiş idrarlarda hızla bozulduklarından, idrar fazla bekletilmeden, en çok iki saat içinde incelenmelidir.Asit idrarda silendir şekillerinin bozulması daha geç olur. Silendirlerin korunması için, idrar düşük dansiteli ise NaCl eklenir, alkali ise konsantre HCl damlatılır ve uzun süre bekletilmeden incelenir.
31Hiyalin silendirler, homojen, şeffaf, jelatine benzer bir maddeden yapılmışlardır. Taze santrifüj edilmiş idrar incelemesinde küçük büyütmeyle her alanda 0-2 hiyalin silendir görülmesi normaldir.
32Granüler silendirler, bazen büyük bazen küçük protein granülleri ve yağ damlalarından oluşmuşlardır. Granüler silendirler, böbreklerle ilgili piyüri ve hematürilerde görülebilirler; hücresel elemanlar ileri derecede dejenere olmuşlardır. Ağır egzersiz ve ateşli hastalıklardan sonra da idrar sedimentinde geçici olarak granüler silendirler görülebilir.
33Epiteliyal silendirler, genellikle granül ve yağ damlacıkları içerirler; otoliz nedeniyle hücre ve çekirdek sınırları kısmen kaybolmuştur.
34Lökosit silendirleri, ya birbirine yapışmış lökositlerden ya da hiyalin silendir üzerine oturmuş lökositlerden oluşmuşlardır.Lökosit silendirleri, akut glomerülonefritin eksüdatif fazında ve piyelonefritte görülürler.
35Eritrosit silendirleri, ya birbirine yapışmış eritrositlerden ya da hiyalin silendir üzerine oturmuş eritrositlerden oluşmuşlardır.Eritrosit silendirleri, akut glomerülonefritte, lupusta ve malign hipertansiyonda glomerüllerde hasar oluştuğunda görülürler.
36Mum silendirler, genellikle diğer silendirlerden daha büyük ve geniştirler; ana madde, homojen, ışığı şiddetle kırar ve açık sarımsı renktedir.
37Dev silendirler, kısmen hiyalin kısmen granüler karışık silendirlerdir.
38Yağ silendirleri, ışığı şiddetle kıran silindir şeklinde elemanlardır.
39İdrar sedimentinde silendirler, böbrek parankim hastalığına işaret ederler. Genellikle idrar sedimentinde silendir görülen durumlar şunlardır:1) Glomerülopatiler, Alport sendromu, benign rekürran hematüri, IgA-IgG nefropatisi (Berger hastalığı), böbrek tüberkülozu, piyelonefrit gibi primer böbrek hastalıkları.2) Vasküler hastalıklar ve kollajen doku hastalıkları gibi sistemik hastalıklar.
40İdrar sedimentinde görülen silendirlerin türü ve miktarı, böbrek hastalığının türünü belirlemede yardımcıdır:Eritrosit ve lökosit silendirleri genellikle glomerülonefriti;geniş silendirler kronik böbrek yetmezliğinin son dönemini yansıtırlar.Silendirüri ile birlikte olan massif proteinüri, nefrotik sendromu;silendirüri şiddetli ise glomerülonefriti düşündürür.
41İdrar sedimentinde kristaller İdrar pH’ına göre çeşitli olabilirler.Asit idrarda görülebilen kristallerHafif asit, nötral veya hafif alkalik idrarda görülebilen kristallerNötral veya alkalik idrarda görülebilen kristallerAlkalik idrarda görülebilen kristaller
42Asit idrarda görülebilen kristaller, amorf ürat, ürik asit kristalleri, kalsiyum oksalat kristalleri, sistin kristalleri, lösin kristalleri, tirozin kristalleri olabilir.
43Amorf ürat, makroskopik olarak balçık renginde çökelti oluşturur; mikroskopta küçük tanecikler halinde ve genellikle küçük topluluklar oluşturmuş halde görülürler; silindir şeklinde de toplanabilirler ve bu durumda granüler silendirlerden güç ayırdedilirler.
44Ürik asit kristalleri, makroskopik olarak sarımtrak kahverengi tanecikler şeklinde idrar toplama kabının kenarlarında tanınabilirler; mikroskopta sarımtrak kahverengi veya kırmızı renkte, çeşitli boy ve şekillerde görülürler; bileği taşı, halter, fıçı şekilleri sıktır ve rozet şeklinde toplanma eğilimi gösterirler.
45Sistin kristalleri, ürik asit kristallerine benzerler; ışığı fazla kıran sekiz köşeli plaklar şeklindedirler ve genellikle birbirini örtmüş olarak bulunurlar.Sistin kristalleri, sistinüride idrar sedimentinde görülebilirler.
46Lösin kristalleri ve Tirozin kristalleri: Lösin kristalleri küre şeklindedirler ve genellikle radiyer veya konsantrik hatlara sahiptirler.Tirozin kristalleri ince iğneler şeklindedirler.Lösin ve tirozin kristalleri, ağır karaciğer yetmezliğinde idrar sedimentinde görülebilirler.
47Hafif asit, nötral veya hafif alkali idrarda görülebilen kristaller, kalsiyum oksalat kristalleri, tersiyer kalsiyum fosfat kristalleri, sulfonamidler olabilir .
48Kalsiyum oksalat kristalleri, ışığı şiddetle kıran zarf, nadiren halter veya bisküvi şeklindedirler; büyüklükleri değişiktir; ikterik idrarda sarı renkli görülürler; sık görülen şekilli elemanlardır.
49Tersiyer kalsiyum fosfat kristalleri, renksiz, genellikle bir ucu kama şeklinde sivri iğneler şeklindedirler; sivri uçları biraraya toplanarak rozet şekli oluşturabilirler.
50Sulfonamidler, makroskopik olarak sarı bir çökelti oluştururlar; mikroskopta amorf veya sarı yeşil renkli iğne, halter, yıldız şekillerinde görülürler.
51Nötral veya alkali idrarda görülebilen kristaller, magnezyum fosfat, kalsiyum karbonat kristalleri olabilir.
52Magnezyum fosfat kristalleri, makroskopik olarak bütün renkleri veren yanar döner ince pulcuklardır; ince bir yağ tabakasını hatırlatırlar; mikroskopta kenarları kırılmış lameller düzensiz dizilmiş görünümü verirler.Kalsiyum karbonat kristalleri, makroskopik olarak nadiren fosfatlar gibi bir çökelti oluştururlar; mikroskopta amorf tanecikler veya küre şeklinde görülürler; genellikle halter şeklinde birbirleri ile birleşmişlerdir.
53Alkali idrarda görülebilen kristaller, amorf fosfat, tripel fosfat (amonyum magnezyum fosfat), tersiyer kalsiyum fosfat kristalleri ve amonyum ürat olabilir.
54Amorf fosfat, makroskopik olarak bol bulunan lökositler gibi çökelti oluştururlar; mikroskopta ince taneli renksiz kitleler olarak görülürler.
55Tripel fosfat (amonyum magnezyum fosfat), idrar çabuk soğumuşsa kar tanesine benzer, yavaş soğumuşsa tabuta benzer prizmalar şeklinde görülürler.
56Amonyum ürat, yer elması veya şalgama benzer şekillerde görülür.
57İdrar sedimentinde bakteri, mantar ve parazit hücreleri
60İdrar sedimentinin incelenmesinde çeşitli kaynaklı hatalar olabilir: a) Hızlı ve uzun süre santrifüj, silendirleri bozabilir.b) Santrifüjden sonra santrifüj tüpünün dibinde kalan sedimentin çalkalanarak süspansiyon haline getirilmesi iyi yapılmamış olabilir.c) Lamelin altında hava kabarcığı kalması ve lamelin dışına idrar taşması hatalı değerlendirmeye neden olabilir.
61d) Eritrositler, mantar hücreleri, ürat kristalleri ve yağ damlaları ile karıştırılabilirler; ayırıcı tanı şu şekilde yapılır: Lamelin kenarına %3’lük asetik asit damlatılmasıyla eritrositler erirler; mantar hücreleri genellikle zincir oluşturmuş halde görülürler ve asetik asitte erimezler; ürat kristalleri koyu kahverengi ve çeşitli büyüklüktedirler; yağ damlaları ışığı şiddetle kırarlar, çeşitli büyüklüktedirler ve genellikle ovaldirler.e) Parçalanmış lökositler amorf fosfatlar ile karıştırılabilirler; ayırıcı tanı şu şekilde yapılır: Lamelin kenarına %3’lük asetik asit damlatılmasıyla fosfatlar, eriyerek kaybolurlar.
62f) Silendirler, düşük dansiteli, alkali ve uzun süre beklemekle bakteri üremiş idrar örneklerinde hızla bozulurlar; böbrek yetmezliğine bağlı olarak idrar konsantre ve asit olamıyorsa birkaç NaCl kristali veya birkaç damla konsantre HCl eklenmek suretiyle silendirler korunabilir.g) Silendiroidler ve psödosilendirler, silendir sanılabilirler; ayırıcı tanı şu şekilde yapılır: Silendiroidler müsin veya epitel hücrelerinden oluşurlar, şerit şeklinde ve uçları pürtüklüdür; psödosilendirler asetik asitle eriyen fosfat veya ısıtmakla eriyen üratlardan oluşan şekilli elemanlardır.h) Normal idrarda da bir miktar bulunabilen ve durmakla çöken mukus, mikroskopta uzun ve saydam şeritler şeklinde görülür, kristalleri ve hatta hücreleri örtebilir.
63İdrar yolları taşlarıİdrarda bulunan kalsiyum fosfat, ürik asit gibi bazı maddeler, koruyucu kolloidlerin etkisiyle aşırı doymuş çözeltiler halinde çökmeden atılabilmektedirler.Ancak, idrarda koruyucu kolloidlerin azalması durumunda, normalde aşırı doymuş çözeltiler halinde atılan maddeler idrar yollarında çökerler ve idrar yolları taşlarını oluştururlar.
64İdrar yolları taşları, fosfat taşları, okzalat taşları, ürat taşları, miks taşlar olabilir. Fosfat taşları, açık renkli toprak gibidirler; elle kolayca ezilirler.Okzalat taşları, pürtüklü yüzeyli, esmer renklidirler; çok serttirler.Ürat taşları, düzgün yüzeyli, esmer renkli, küçük taşlardır; serttirler.Miks taşlar, fosfat-okzalat veya okzalat-ürat karışımı taşlardır.
65İdrar yolları taşları 50 yaşlarında en sık görülür.
66İdrar yolları taşlarında sıklık: -Okzalat taşları % 56-Tripel fosfat taşları % 26,5-Fosfat taşları % 13,5-Ürik asit taşları % 4
67Bir idrar yolu taşının fosfat taşı olup olmadığının incelenmesi: Fosfatın, amonyum molibdat ile ısıtma sonucunda suda güç çözünen, sarı renkli amonyum fosfomolibdat oluşturması prensibine dayanır.İdrar yolu taşı havanda ezilerek toz haline getirilir ve bir deney tüpüne bu tozdan bir miktar konur. Deney tüpündeki idrar yolu taşı üzerine 1 mL konsantre HNO3 eklenerek karıştırılır ve taş tozu çözülür. Tüpteki karışım üzerine 2 mL %12,5’lik amonyum molibdat çözeltisi eklenir ve karıştırılır. Tüpteki son karışım, kaynama noktasına kadar ısıtılır; renk değişimine göre sonuç rapor edilir.
68Bir idrar yolu taşının fosfat taşı olup olmadığının incelenmesi deneyinde; kaynama noktasına kadar ısıtılan son karışımda limon sarısı bir renk ve çökelti oluşumu gözlenirse, idrar yolu taşının fosfat taşı olduğu sonucuna varılır. İstenirse lam-lamel arasına alınan çökelti mikroskopta incelenerek iğne demeti şeklinde fosfat kristalleri görülebilir.Kaynama noktasına kadar ısıtılan son karışımda limon sarısı bir renk ve çökelti oluşumu gözlenmezse; idrar yolu taşı, fosfat taşı değildir.İdrar yolu taşının fosfat taşı olması durumunda, deney sırasında fosfat ile amonyum molibdatın ısıtılması sonucunda amonyum fosfomolibdat oluşur; gözlenen limon sarısı renk ve çökelti, oluşan amonyum fosfomolibdattan ileri gelmektedir.
69Bir idrar yolu taşının ürat taşı olup olmadığının incelenmesi (mürexid deneyi): Ürik asit ile nitrik asidin birlikte ısıtılması sonucunda purpurik asit oluşması prensibine dayanır.İdrar yolu taşı havanda ezilerek toz haline getirilir ve bir porselen kapsüle bu tozdan bir miktar konur. Kapsüldeki idrar yolu taşı üzerine 1-2 damla konsantre HNO3 damlatılır. Porselen kapsül, bir saçayak üzerinde, içindeki madde kuruyuncaya kadar ısıtılır ve sonra soğutulur. Soğuyan kapsüldeki leke üzerine 1 damla NaOH damlatılır; lekedeki renk değişimine göre sonuç rapor edilir.
70Bir idrar yolu taşının ürat taşı olup olmadığının incelenmesi (mürexid deneyi) deneyinde; soğuyan kapsüldeki leke üzerine 1 damla NaOH damlatıldığında mavi-menekşe renk gözlenirse, idrar yolu taşının ürat taşı olduğu sonucuna varılır.soğuyan kapsüldeki leke üzerine 1 damla NaOH damlatıldığında mavi-menekşe renk gözlenmezse, idrar yolu taşı ürat taşı değildir.İdrar yolu taşının ürat taşı olması durumunda, deney sırasında önce ürik asit ile nitrik asidin birlikte ısıtılması sonucunda purpurik asit oluşur, daha sonra da purpurik asidin NaOH ile reaksiyonlaşması ile mavi-menekşe renkli izopurpurik asit sodyum tuzu oluşur; gözlenen mavi-menekşe renk, oluşan izopurpurik asit sodyum tuzundan ileri gelmektedir.
71Bir idrar yolu taşının ürat taşı olup olmadığının incelenmesi (mürexid deneyi) deneyinde; NaOH yerine amonyak çözeltisi kullanılsaydı, ürat taşı ile mavi-menekşe renk yerine mor renk oluştuğu gözlenirdi. Çünkü, purpurik asit ile amonyağın oluşturduğu izopurpurik asit amonyum tuzu, mavi-menekşe değil, mor renklidir.Bazen ısıtma sırasında porselen kapsüldeki idrar yolu taşında bulunan üreden amonyak oluşur ve bu, idrar yolu taşının ürat taşı olması durumunda lekenin kendiliğinden mor renk almasına neden olabilir.
72Bir idrar yolu taşının okzalat taşı olup olmadığının incelenmesi: Toz haline getirilmiş taştan bir deney tüpüne bir miktar konur ve 1/10 oranında sulandırılmış HCl’den 4 mL eklenerek kaynar dereceye kadar ısıtılır.Karışım sıcakken süzülür ve süzüntüye 1 mL %16 mg’lık KMnO4 çözeltisi eklenir. Çözeltinin 10 dakika içinde renksizleşmesi, taşın okzalat taşı olduğunu gösterir.