Hoechst Boyası Nedir Hoechst Boyası Tanımı Hoechst Boyası Özellikleri
Hoechst boyaları floresans mikroskopisinde ve akış sitometresinde DNA'yı işaretlemek için kullanılan floresan boyalardandır. Bu boyalar DNA'yı işaretlediği için, ayrıca mitokondrileri boyamakta da kullanılır. bis-benzimid türü olan bu boyalardan iki tanesi yaygın olarak kullanılır: Hoechst 33258 ve Hoechst 33342.
- HeLa hücrelerinin transmisyon mikroskop görüntüsü ile birleştirilmiş, Hoechst 33258 boyamalı (mavi) resim. Soldaki hücre mitoz bölünmenin prometafaz safhasında; kromozomlarında çok miktarda sıkıştırılmış DNA bulunduğu için parlak şekilde floresans gösermektedir.
Her iki boya da morötesi ışık ile 350 nm civarında uyarılır, her ikisi de 461 nm yayım maksimumunda mavi/siyan renkte floresan ışık yayarlar. Hoechst boyaları canlı veya fikse edilmiş hücrelerde kullanılabilirler, çoğu zaman bir diğer nükleik asit boyası olan DAPI yerine kullanılırlar. Aralarındaki en önemli fark, Hoechst 33342'deki ek etil grubunun onu daha lipofilik yapması ve dolayısıyla hücre zarı ile etkileşmesini daha muhtemel kılmasıdır. Bazı uygulamalarda Hoechst 33258 belirgin derecede daha az zar geçicidir.
Bu boyalar ile, standart bir floresan yayım - miktar eğrisine bakılarak, bir numunedeki DNA miktarı tespit edilebilir.
Hoechst boyaları DNA'ya bağlandığı için hücre bölünmesi sırasında DNA ikileşmesini bozabililer. Dolayısıyla potansiyel olarak mutajenik ve kanserojeniktirler. Kullanım ve atımlarında gerekli tedbirler alınmalıdır.
Hoechst boyaları insan ve diğer hayvanlarda sperm ayrımı için de kullanılırlar.
- DNA'nın (mavi ve yeşil) küçük oyuğuna bağlı Hoechst (magenta). PDB 264D koordinatlarından.