Amiloidozu bulmak için nasıl bakılacağını bilmek zorundasınız.
Biyopsi , küçük bir doku numunesinin elde edildiği, işlendiği ve mikroskop altında incelendiği bir prosedürdür. Biyopside amiloidozu saptamak için hem işleme hem de inceleme aşamalarında özel teknikler gereklidir. Bu teknikler kullanılmazsa veya deneyimsiz laboratuvar personeli tarafından yanlış kullanılırsa, amiloidoz tanısı gözden kaçabilir . Prosedür doğru bir şekilde uygulanmış olsa bile bazen tanı atlanır. Bu nedenle, biyopsi negatif olsa bile, amiloidozu dışlamak için bir SAP taraması önerilebilir.
Vücudun hemen hemen her organından bir biyopsi örneği alınabilir ve aşağıdakilerden biri olabilir:
- Amiloidozşüphesi var.
veya:
2. Bir organın işlevinde açıklanamayan bir bozulma vardır.
Sistemik amiloidoz şüphesi varsa, biyopsi çeşitli yerlerden alınabilir. Prosedür basit, hızlı, güvenli ve nispeten ağrısızdır. Genellikle küçük bir parça yağ dokusu mide bölgesinin (abdominal yağ biyopsisi ) veya rektumun cildinden alınır.
Abdominal yağ biyopsisi şu şekilde ilerler:
- Mide bölgesindeki küçük bir deri alanı lokal anestezi ile uyuşturulur.
- Cildin altından bir miktar yağ hücresini çıkarmak için uyuşma bölgesine bir iğne yerleştirilir.
- Yağ hücreleri korunur ve analiz için laboratuvara gönderilir.
Sistemik amiloidoz varsa, böyle bir örnekte sıklıkla saptanabilir. Bununla birlikte, amiloidozu olan bazı hastalarda, incelenen küçük doku örneğinde, amiloid fibrilleri bulunmayabilir. Yani bir biyopsi negatif olsa bile, bir SAP taraması amiloidozu dışlamak için önerilebilir.
Normal olarak çalışmadığının nedenini saptamak için belirli bir organdan biyopsi de alınabilir. Bu gibi durumlarda amiloidoz , olası tanıların uzun bir listesinden biri olabilir, bu nedenle numuneyi hazırlarken ve incelerken uygun teknikleri kullanmak için mikroskop altında dokuyu inceleyen doktor için çok önemlidir.
Amiloid biyopsisinde tespit edilebilir:
- böbrekler
- karaciğer
- kalp
- bağırsak
- sinirler
- Lenf düğümleri
- cilt
- tiroid bezi
- kemik iliği
Hastaneler genellikle biyopsi slaytlarını koruduğundan, genellikle NAC histopatologlarının (mikroskop lamı üzerinde materyali inceleme konusunda uzmanlaşmış doktorlar) mümkünse bunları gözden geçirmeleri önerilir.
Biyopsi – amiloid nasıl tespit edilir?
Histopatologlar, mikroskop altında vücut dokularının slaytlarına bakma konusunda uzman doktorlardır. Çok küçük doku örneklerine bakabilir ve farklı hücre tiplerinin karakteristik görünümünü tanıyarak hangi organdan alındıklarını belirleyebilirler. Ayrıca, vücut hücrelerine verilen hasarı farklı hastalıklarla gözlemleyerek tanı koyabilirler. Belli boyalarla boyandıktan sonra doku örneklerini inceleyerek çeşitli hastalık süreçlerine ek bakış açıları kazanabilirler.
Bu önemlidir, çünkü amiloid tortuları “ Congo kırmızısı ” adı verilen özel bir boya ile lekelenerek belirlenir. Amiloidoz şüphesi varsa, slayttaki doku örneğine Congo kırmızısıboyası uygulanır ve bu çok kesin bir yönteme göre uygun şekilde yapılmalıdır. Kongo kırmızısı boya molekülleri kendilerini amiloid fibrillere bağlarlar ve daha sonra orada tespit edilebilirler ve vücuttaki diğer yapıların lekelenmesinden, polarize ışık kullanılarak çok kuvvetli aydınlatma altında mikroskobik inceleme ile ayırt edilebilirler. Bu doğru yapıldığında ve polarize ışık için özel bir filtre mikroskop üzerinde döndürüldüğünde, Kongo kırmızısı boyası ile boyanmış amiloid tortuları çok karakteristik bir “elma yeşili” rengine dönüşen kırmızı renkte benzersiz bir şekilde ortaya çıkar ve tekrar ortaya çıkar. çift kısırlık veya dikroizm olarak, amiloid tanısı için “altın standart” dır. Bu en iyi testtir ve diğer tüm testler buna karşı ölçülür. Ancak, prosedürdeki tüm aşamaların deneyimli laboratuar personeli tarafından dikkatli ve doğru bir şekilde gerçekleştirilmesi hayati önem taşımaktadır. Slaytların hazırlanmasında, boyanmasında veya görüntülemede herhangi bir hata, yanlış veya yanlış bir teşhise yol açabilir.
Farklı amiloidoz tipleri arasında ayrım yapmak
Farklı amiloidoz tipleri çok farklı tedaviler gerektirir. Amiloidoz tanısı doğrulandıktan sonra, mevcut amiloid fibril tipinin doğru tanımlanması gereklidir, böylece uygun tedaviye başlanabilir.
Aşağıda tartışılan laboratuvar teknikleri, mevcut amiloid fibril tipini belirlemek için kullanılmıştır. İmmünhistokimya ve proteomik doku biyopsi örneklerine uygulanan tekniklerdir. Bu sayfanın alt kısmında tartışılan genetik testler, hastanın damarından alınan kan örnekleri üzerinde gerçekleştirilir.
Amiloid fibril analizi
İmmünhistokimya :
Bu, antikorların mevcut amiloid fibril tipinin belirlenmesinde yardımcı olabileceği bir laboratuar tekniğidir. Bu testler biyopsiörneklerinden doku üzerinde gerçekleştirilir.
Antikorlar ve bağlandıkları proteinler (antijenler) anahtarlara ve kilitlere benzer olarak görülebilir. Bir dizi farklı tuş birçok yönden benzer olabilir, ancak her biri sadece bir kilitle uyumludur. Benzer şekilde, farklı antikor molekülleri belirli antijenleri çok spesifik bir şekilde (bağlanır) bağlar. Her birtek tip amiloid fibril proteini arasında özel olarak tanıyan ve ayırt eden testlerde kullanılmak üzere antikorlar oluşturmak mümkündür ve bunlar bu amaçla rutin olarak kullanılır.
Bu yaklaşım özellikle tanımlanmasında yardımcıdır
- AA amyloidfibrilleri
- -2-mikroglobulin amiloidfibrilleri
- ATTR amyloidfibrilleri
İlk olarak, amiloid tanısı daima, Congo kırmızısı boyama ve polarize ışık altında çift kırılma kullanılarak doğrulanmalıdır. Daha sonra amiloid içeren dokuya farklı antikorlar uygulanabilir.
AA amiloid fibrilleri mevcut ise, serum amiloid A ( SAA ) proteinine karşı antikorlar her zaman fibrillere yapışacaktır, bu nedenle AA amiloidozu teşhis edilebilir.
Eğer β2-mikroglobulin amiloid fibrilleri mevcut ise, β2-mikroglobulin antikorları her zaman fibrillere yapışacaktır, böylece β2-mikroglobulin amiloidozu teşhis edilebilir.
Eğer ATTR amiloid fibrilleri mevcut ise, TTR antikorları her zaman fibrillere yapışacaktır, bu nedenle ATTR amiloidozu teşhis edilebilir.
Bununla birlikte, bu teknik, amiloid fibrilleri oluşturabilen çok çeşitli farklı hafif zincirlerebağlı olarak, tüm AL amyloidoz vakalarının yaklaşık yarısında faydalıdır. AL amiloidozluher bir hastanın kendi monoklonal, amiloid fibrillerini oluşturan proteinleri vardır ve hafif zincirlere standart antikorlar bunlardan bazılarına yapışamaz.
Proteomikler :
Bu yöntem nispeten yenidir ve kurulması çok karmaşık ve pahalıdır. Mevcut olduğu yerde, şimdi amiloid fibrillerinin tipini tanımlamak için altın standart test olarak kabul edilir. Bu, bunun mevcut olan en iyi test olduğu ve diğer testlerin doğruluğunun bu teste göre ölçüldüğü anlamına gelir.
Yöntem biyopsi örneklerinden dokuya uygulanır.
Lazer mikrodiseksiyon ve tandem kütle spektrometresi olarak adlandırılan teknikleri içerir.
Lazer mikrodiseksiyon: Amiloid fibrilleri içeren dokunun bir bölümü mikroskopta incelenir ve sadece amiloid tortuları bir lazer kullanılarak kesilir ve daha sonra analiz için hazırlanır.
Tandem kütle spektrometresi: hazırlanan amiloid depozit fragmanları, mevcut protein ve protein parçalarının türünü tanımlayan bir spektrometre olarak adlandırılan bir makinede analiz edilir.
Bu teknikleri kullanarak, diğer tekniklerin kesin bir tanıya yol açmamış olduğu durumlar da dahil olmak üzere, mevcut amiloid fibril tipinin, vakaların% 100’üne yakın olarak tanımlanabilir.