We are searching data for your request:
Upon completion, a link will appear to access the found materials.
Elektroforez, nispeten düzgün bir elektrik alanı içinde parçacıkların bir jel veya akışkan içindeki hareketini tarif etmek için kullanılan bir terimdir. Elektroforez, yük, boyut ve bağlanma afinitesine bağlı olarak molekülleri ayırmak için kullanılabilir. Bu teknik esas olarak DNA, RNA, proteinler, nükleik asitler, plazmitler ve bu makromoleküllerin parçaları gibi biyomolekülleri ayırmak ve analiz etmek için uygulanır. Elektroforez, babalık testi ve adli tıpta olduğu gibi, kaynak DNA'yı tanımlamak için kullanılan tekniklerden biridir.
Anyonların elektroforezi veya negatif yüklü partiküller anaphoresis. Katyonların veya pozitif yüklü parçacıkların elektroforezi denir kataforez.
Elektroforez ilk olarak 1807'de Moskova Devlet Üniversitesi'nden Ferdinand Frederic Reuss tarafından sürekli elektrik alanlarına maruz kalan suda göç eden kil parçacıklarını fark etti.
Anahtar Paketler: Elektroforez
- Elektroforez, bir elektrik alanı kullanarak bir jel veya sıvı içindeki molekülleri ayırmak için kullanılan bir tekniktir.
- Elektrik alanındaki parçacık hareketinin hızı ve yönü molekülün boyutuna ve elektrik yüküne bağlıdır.
- Genellikle elektroforez, DNA, RNA veya proteinler gibi makromolekülleri ayırmak için kullanılır.
Elektroforez Nasıl Çalışır?
Elektroforezde, bir parçacığın ne kadar hızlı hareket edebileceğini ve hangi yönde hareket edebileceğini kontrol eden iki temel faktör vardır. İlk olarak, örnek üzerindeki yük önemlidir. Negatif yüklü türler, bir elektrik alanın pozitif kutbuna çekilirken, pozitif yüklü türler negatif uca doğru çekilir. Alan yeterince güçlüyse nötr bir tür iyonize edilebilir. Aksi takdirde, etkilenme eğilimi yoktur.
Diğer faktör partikül büyüklüğüdür. Küçük iyonlar ve moleküller bir jel veya sıvı içinde büyüklerinden çok daha hızlı bir şekilde hareket edebilir.
Yüklü bir parçacık, bir elektrik alanındaki karşı yüke çekilirken, bir molekülün nasıl hareket ettiğini etkileyen başka kuvvetler de vardır. Sürtünme ve elektrostatik geciktirme kuvveti, parçacıkların akışkan ya da jel boyunca ilerlemesini yavaşlatır. Jel elektroforezi durumunda, hareketliliği etkileyen jel matrisinin gözenek büyüklüğünü belirlemek için jelin konsantrasyonu kontrol edilebilir. Ortamın pH'sını kontrol eden bir sıvı tamponu da mevcuttur.
Moleküller bir sıvı veya jelden çekildiğinde, ortam ısınır. Bu, molekülleri denatüre etmenin yanı sıra hareket hızını da etkileyebilir. Voltaj, molekülleri ayırmak için gereken süreyi en aza indirmeye çalışmak, aynı zamanda iyi bir ayrılmayı sürdürmek ve kimyasal türleri sağlam tutmak için kontrol edilir. Bazen elektroforez, ısıyı telafi etmek için buzdolabında gerçekleştirilir.
Elektroforez Çeşitleri
Elektroforez, çeşitli ilgili analitik teknikleri içerir. Örnekler şunları içerir:
- afinite elektroforezi - Afinite elektroforezi, partiküllerin kompleks formasyona veya biyospesifik etkileşime dayalı olarak ayrıldığı bir elektroforez türüdür.
- kapiler Elektroforez - Kılcal elektroforez, temel olarak atom yarıçapı, yük ve viskoziteye bağlı olarak iyonları ayırmak için kullanılan bir elektroforez türüdür. Adından da anlaşılacağı gibi, bu teknik genellikle bir cam tüp içinde gerçekleştirilir. Hızlı sonuçlar ve yüksek çözünürlüklü bir ayırma sağlar.
- jel elektroforezi - Jel elektroforezi, moleküllerin bir elektrik alanının etkisi altında gözenekli bir jel boyunca hareket ile ayrıldığı, yaygın olarak kullanılan bir elektroforez türüdür. İki ana jel materyali agaroz ve poliakrilamittir. Jel elektroforezi, nükleik asitleri (DNA ve RNA), nükleik asit fragmanlarını ve proteinleri ayırmak için kullanılır.
- immunoelektroforezde - İmmünoelektroforez, antikorlara karşı reaksiyonlarına dayanarak proteinleri karakterize etmek ve ayırmak için kullanılan çeşitli elektroforetik tekniklere verilen genel isimdir.
- elektrobeneklenme - Elektroblotlama, elektroforezi takiben nükleik asitleri veya proteinleri bir zara aktararak geri kazanmak için kullanılan bir tekniktir. Poliviniliden florür (PVDF) veya nitroselüloz polimerleri yaygın olarak kullanılır. Örnek geri kazanıldıktan sonra, lekeler veya problar kullanılarak daha da analiz edilebilir. Western blot, yapay antikorlar kullanarak spesifik proteinleri tespit etmek için kullanılan bir elektro-lekeleme şeklidir.
- darbeli alan jel elektroforezi - Darbeli alan elektroforezi, bir jel matrisine uygulanan elektrik alanın yönünü periyodik olarak değiştirerek DNA gibi makro molekülleri ayırmak için kullanılır. Elektrik alanın değişmesinin nedeni, geleneksel jel elektroforezinin, hepsi birlikte göç etme eğiliminde olan çok büyük molekülleri verimli bir şekilde ayıramamasıdır. Elektrik alanın yönünü değiştirmek, moleküllere hareket etmesi için ek yönler verir, böylece jelin içinden bir yolu vardır. Gerilim genellikle üç yön arasında değiştirilir: biri jelin ekseni boyunca, diğeri ise 60 dereceden iki tarafına. İşlem geleneksel jel elektroforezinden daha uzun sürse de, büyük DNA parçalarını ayırmada daha iyidir.
- Izoelektrik odaklama - İzoelektrik odaklama (IEF veya elektro odaklanma), farklı izoelektrik noktalara dayalı molekülleri ayıran bir elektroforez şeklidir. IEF genellikle proteinler üzerinde gerçekleştirilir, çünkü elektrik yükleri pH'a bağlıdır.