This translation into Turkish was automatically generated through Google Translate.
English Version | Other Languages
Department of Physiology and Biophysics, University of California, Irvine (UCI)
This article is a part ofJoVE General. If you think this article would be useful for your research, please recommend JoVE to your institution's librarian.Recommend JoVE to Your Librarian
Current Access Through Your IP Address
Current Access Through Your Registered Email Address
Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).
Dönüşüm ısı şok yöntemi kullanılarak E. coli içine plazmid DNA moleküler biyolojinin temel bir tekniktir. Bu bakteri yabancı bir plazmid veya ligasyonu ürün ekleme oluşur. Bu video protokolü Genlantis piyasada bulunan kimyasal yetkili bakteri kullanarak dönüşüm geleneksel yöntem açıklanır. Buz kısa bir inkübasyondan sonra, 45 saniye boyunca 42 ° C'de kimyasal yetkili bakteri ve DNA karışımı konur (ısı şok) ve ardından buz geri yerleştirilir. SOC medya eklenir ve dönüştürülmüş hücreleri ile 37 ° C de 30 dakika süreyle ajitasyon inkübe edilir. Dönüşüm verimliliği bağımsız koloniler izole emin olmak için, iki miktarlarda dönüştürülmüş bakteri kaplanmıştır. Bu geleneksel protokol ticari olarak satılan birçok yetkili bakterileri dönüştürmek için başarıyla kullanılabilir. Genlantis turbocells bir roman 3 dakika dönüşüm protokolü, kullanım kılavuzunda açıklanan de kullanılabilir.