Hangi Kapiler Seçilmeli – Farmasötik Analiz İçin Kapiller Elektroforez Yöntemleri – Ayırma Teknolojisi –FARMASÖTİK ANALİZ – Kimya Mühendisliği – Ayırma Teknolojisi Ödevleri – Kimya Mühendisliği Ödev Yaptırma – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
GİRİŞ
Bir yöntemin performans talepleri, amaçlanan kullanımına bağlıdır. Tahliller, düşük seviyeli safsızlık tespitlerinden daha yüksek seviyede hassasiyet gerektirir. Deneyimli bir bilim insanı tarafından yapılan tek seferlik özel bir araştırma, daha az sağlamlık gerektirir ve özel “hilelerden” daha fazla faydalanabilir, bir kalite kontrol (QC) yönteminden daha fazla kullanılabilir ve bu yöntem, yıllarca günlük olarak aktarılması ve çalıştırılması gerekir.
Aşağıdaki soruları dikkate almak önemlidir: Ultra yüksek verimlilik veya çözünürlüğe mi ihtiyacınız var, yoksa yalnızca bir defaya mahsus yeterince iyi bir araştırma için mi gidiyorsunuz? Hız / hızlı analiz önemli mi? İlgili bileşiklerinizi bozucu matris bileşenlerinden ayırmak için numune bileşenlerinin dedektörden aynı yönde göç etmesi gerekmeyen kapiler elektroforezin (CE) (sıvı kromatografi (LC) ile karşılaştırıldığında) özel özelliğini kullanabilir misiniz? Metodunuz özel bir laboratuar tarafından mı yoksa temel eğitim tarafından mı yürütülecek? Herhangi bir yöntem geliştirmeye başlamadan önce, yöntemin amacını bilmeniz ve yöntemin amacından performans taleplerini tanımlamanız gerekir.
Sağlam yöntemler geliştirmek için basit yöntemlerin tercih edilebilir olduğunu aklınızda bulundurmalısınız. Ayrıca, kromatografik bir geçmişiniz varsa, CE kesinliğini (ve daha az ölçüde doğruluğu) etkileyen faktörler, şu anda ilaç testi için ağırlıklı olarak kullanılan teknik olan HPLC’den büyük ölçüde farklıdır.1 Aralarında seçim yapmak için genel bir tercih yoktur. teknikler: CE, LC veya diğerleri.
Seçim, belirli bir probleme yönelik tekniklerin göreceli değerleri ve yöntem geliştiren bilim adamının deneyimi gibi faktörlerle desteklenen bilimsel bir temelde yapılmalıdır. Sağlam CE yöntemleri, nispeten deneyimsiz QC ve Sözleşmeli Araştırma Organizasyonu (CRO) laboratuvarlarına başarıyla aktarılmıştır.
Bu bölüm, analit veya özel analiz açısından değil, sağlamlık açısından yöntem parametrelerini tartışmaktadır. Bazı yönler, birden çok yön üzerinde etkiye sahipse ve diğer bölümlerle örtüşmesi kaçınılmazsa, farklı bölümler altında adlandırılacaktır. Bölüm bir inceleme değildir (Bölüm 9), ancak açıklayıcı örnekler verecektir. Yöntem geliştirme sırasında yardımcı olması amaçlanmıştır ve ekipmanın mevcut durumuna dayanmaktadır.
Sunulan stratejiler, tartışılan konuları ele almanın “tek” yolu olarak görülmemektedir. En iyi performansı elde etmek için CE prosedürlerinin nasıl kullanıldığına dair örnekler olarak sunulmuştur (daha fazla tartışma için bu çalışmadaki diğer ilgili bölümlere bakın). Umarım bu bölüm farkındalığı artıracak ve daha sağlam yöntemlerin geliştirilmesine yardımcı olacaktır.
Bu bölüm, ilaç endüstrisindeki uzun yıllara dayanan deneyimin, birçok tartışmanın ve diğer CE bilim adamlarıyla deneyimlerin paylaşılmasının bir sonucudur (örneğin, kullanıcı toplantılarında ve özel oturumlarda ve sempozyumlarda bazen ” iyi CE uygulaması ” olarak anılan kısa kurslarda) ve literatürden seçilmiş ipuçları.
Başlamak için bazı genel tavsiyeler: Bir yöntemin açık ve net bir şekilde tanımlanması önemlidir. Günlük kullanımda karşılanamayan beklentileri yükseltmemek için doğrulamada adil olun.
Kapiller damar nedir
Kapiller ne Demek
Kapiller dolaşım nedir
Kapiller kan alma
Venül Nedir
Arteriol Nedir
Kapiller Tüp
Pulmoner kapiller nedir
KAPİLLER
A. Hangi Kapiler Seçilmeli ve Neden
Uzunluk: Analiz süresi perspektifinden veya yüksek alan kuvvetlerini uygulama olanağına sahip olmak için, kapiler mümkün olduğunca kısa olmalıdır. Düşük yayılma için kısa bir kılcal damar da avantajlıdır. Ancak, plaka numarası ve çözünürlüğü etkin uzunluk ile doğrusal olduğundan, karmaşık ayırma sorunları daha uzun kapilerlere ihtiyaç duyar.
İç çap: Genel olarak, daha küçük çaplar daha iyi ısı dağılımına ve dolayısıyla daha az bant genişlemesine sahiptir. Etkili ısı dağıtımı için, zorlamalı konveksiyon, doğal konvektif soğutmadan daha iyidir, 7,8 ancak çoğu cihazda hala soğutma sisteminin dışında parçalar bulunur. BGE’deki (arka plan elektroliti) elektrolit konsantrasyonunun azaltılması, daha geniş kılcal damarların kullanımına izin verir, ancak bu aynı zamanda daha fazla elektrod dağılımı ile sonuçlanır.
Daha iyi algılama hassasiyeti ve azaltılmış entegrasyon hataları için daha büyük kılcal çapların kullanılması avantajlıdır (örneğin referans 9). Ancak akımlar yüksek olduğunda ve Joule ısınması çok fazla olduğunda, uzun bir sıradaki bazı enjeksiyonlar için akım arızası veya tekrarlanamayan sonuçlar gibi sorunlar ortaya çıkabilir. Bant genişlemesi hassasiyeti bile azaltabilir.
Lokal anestezik solüsyonlarda küçük miktarlarda adrenalinin kiral tespiti durumunda, duyarlılık kazanmak için başlangıçta 75 mm’lik bir kapiler seçildi. Ancak sonuç tam tersiydi. 50 mm’lik bir kapilere indirgendiğinde, bant genişlemesi azaldı ve çözünürlük, enjeksiyon hacmi artırılabilecek ve hassasiyet kazanılabilecek kadar artırıldı.
Kılcal duvar: Genel olarak, en basit yaklaşım kaplamasız erimiş silika kapiler kullanmaktır. Ancak bazen bu, kılcal duvara adsorpsiyon sorunları nedeniyle mümkün olmamaktadır veya elektroozmotik akışı kontrol etmek için başka duvar özelliklerine ihtiyaç duyulmaktadır. Literatürde birden fazla örnek var.
Kalıcı olarak kaplanmış kapilerlerin yanı sıra, örneğin trietanolamin, Triton X-100, Polybrene ve kuaterner amonyum tuzları gibi çeşitli dinamik kaplamalar mevcuttur. Bu dinamik kaplamaların avantajı, kaplamanın enjeksiyonlar arasında yenilenebilmesidir, bu da ayırmanın tekrarlanabilirliğini ve tekrarlanabilirliğini geliştirebilir.
Algılama: Verimlilik amacıyla küçük bir kılcal çap isteniyorsa, kılcalın algılama kısmı daha iyi algılama hassasiyeti için uyarlanabilir. Örnekler kabarcık hücreli kılcal ve Z hücresidir. Kabarcık hücre kapilerinde, daha iyi konsantrasyon hassasiyeti elde edilecek şekilde saptama penceresinde kılcal çap büyütülür.
Farmasötik analiz yönteminizde bir kabarcık hücre kılcal damarı uygularsanız, farklı partileri test etmek önemlidir. Ayrıca bir kabarcık hücre kılcal damarına ihtiyacınız olup olmadığını veya uygun bir enjeksiyon prosedürü ile benzer hassasiyet artışı sağlayıp sağlayamayacağınızı test edin. Ayrıca, kabarcık hücresinin bant genişlemesi üzerindeki etkisini kontrol edin. Yaklaşık üç kat daha fazla hassasiyet mümkündür.
Z hücresi için, tespitin çap yerine kılcal uzunluğunda gerçekleşmesi için özel bir arayüz oluşturulmuştur. Bir tarafta konik uçlu iki farklı uzunlukta kapiler arabirime bağlanır. Bu biraz deneyim gerektirir, bu nedenle seti hem deneyimli hem de deneyimsiz farklı analistler tarafından bir araya getirmeyi test etmek önemlidir.
Algılama penceresinde daha uzun bir fiş olduğundan, cihaz yalnızca ilgilenilen analitler arasında yeterli ayrım varsa kullanışlıdır. Sonuç olarak, analit bantları eşzamanlı olarak saptama penceresinde ise, çözünürlük artık gözlenmez. Bir faktör 10 oranında bir duyarlılık artışı mümkündür.
Duyarlılık artışını gözlemlemek için hem kabarcık hücresi hem de Z hücresi yüksek çözünürlüğe ihtiyaç duyduğundan, bunun yerine numune istifleme veya geçici ITP (izotakoforez) gibi akıllı bir enjeksiyon prosedürü ile kullanımdan kaçınıp kaçamayacağınızı test edin. Tespit yaklaşımları hakkında daha fazla bilgi Bölüm 3, 5 ve 15’te verilmektedir.