Bağ Dokusu Lifleri – Laboratuvar Tanı Bilimi – Laboratuvar Ödevleri – Lab Ödevleri – Kimya Mühendisliği – Kimya Ödev Yaptırma Ücretleri
Bağ Dokusu Lifleri ve Kas
Kolajen ve Kas
van Gieson van Gieson ve varyantları, kolajen ve kas için en yaygın kullanılan lekelerdir. Boyama çözeltisi, pikrik asit ve asit fuksin karışımıdır. Van Gieson çözeltisinin asidik yapısı nedeniyle, nükleer boyama için bir demir hematoksilen kullanılır. Kas ve kırmızı kan hücreleri sarıya boyanırken kollajen kırmızıya boyanır; çekirdekler siyahtır.
Trikromlar Kolajen ve kası farklı şekilde gösterecektir. Kas boyaması kırmızıdır, kollajen kullanılan boyama rejimine bağlı olarak mavi veya yeşil olabilir. Cıva bazlı fiksasyon genellikle formaldehitinkilere göre daha üstün sonuçlar verir. Lekenin gerçekleştirilmesi beceri gerektirir. Tri-krom boyamanın arkasındaki teori, çeşitli ve karmaşıktır ve bu bölümün ulaşılamayacak kadar ötesindedir.
Fosfotungstik asit hematoksilin (PTAH)
Genellikle kas dokularının gösterilmesinde kullanılan PTAH, kas çizgilerini ve miyofibrilleri maviye boyayacaktır. Kolajen kırmızıya boyandı.
Retiküler Lifler
Gümüş emprenye
Retiküler lifler öncelikle gümüş emprenye yöntemleri kullanılarak gösterilir. Çok çeşitli gümüş yöntemleri mevcuttur; ancak metodoloji benzerdir. Çekirdeklerin zıt boyanması isteğe bağlıdır.
Retiküler lifler kararır ve diğer yapılar (tonlanmadıkça) kahverengi tonlarında gösterilir. Çekirdekler emprenye edilebilir. Amonyaklı gümüş solüsyonunun hazırlanması beceri gerektirir ve taze yapılmalıdır. Periyodik asit-Schiff (PAS) reaksiyonu ayrıca retiküler lifleri de gösterecektir.
Bağ doku lifleri
Elastik lif nedir
Muköz bağ dokusu
Gevşek bağ doku
Bağ dokusu hücreleri
Sıkı bağ doku
Retiküler bağ doku
Bağ doku tipleri
Bodrum membranları
Glomerüler hastalık tanısı sırasında glomerüler bazal membranların gösterilmesi gereklidir. Kesitler, periyodik asit ile oksitlenir ve bir metenamin gümüş çözeltisi ile emprenye edilir. Reaksiyon ilerleyicidir ve istenen emprenye noktasında durur. İnce taban membran yapılarının görselleştirilebilmesi için 1-2 mm’de kesilmiş bölümler gereklidir. PAS reaksiyonu aynı zamanda bazal membranları göstermek için de kullanılabilir.
1. Bölümleri temizleyin ve damıtılmış suyla durulayın
2. Potasyum permanganat ile oksitleyin
3. Oksalik asitli çamaşır suyu
4. Demir şapı ile hassaslaştırın
5. Bir amonyak gümüş nitrat çözeltisi ile emprenye edin
6. Formaldehit ile azaltın
7. Sodyum tiyosülfat ile sabitleyin
8. Kloroaurik asit (altın klorür) içeren ton (isteğe bağlı)
9. Yıkayın, alkolle kurutun, ksilen ve cam ile işlemden geçirin
Elastin
Elastin dokusunu göstermek için bir dizi boya kullanılabilir. Bunlar hematoksilinden (Verhoeff yöntemi) farklılık gösterebilir; rescorcin fuchsin (Weigert’s, Miller’s); aldehit fuksin ve orcein. Verhoeff’un yöntemi popüler olmasına rağmen, aynı bölümde hem kaba hem de ince elyafı göstermekte güçlük çekiyor.
Miller’in Weigert’in elastin boyası varyantı sürekli olarak iyi ve güvenilir sonuçlar verir. Bu yöntem, kalite güvence çalışmalarında [Birleşik Krallık Ulusal Hücresel Patoloji Tekniği için Ulusal Kalite Dış Kalite Güvence Hizmeti] diğer yöntemlerden tutarlı bir şekilde daha yüksek puan alır. Orcein, ciltte elastini gösterme konusunda popüler olduğunu kanıtladı. van Gieson’un bağ dokusu boyası genellikle elastin boyasını zıtlaştırmak için kullanılır.
Karbonhidratlar ve Mukosub Maddeler
Farklı pH’larda hazırlanan alsiyan mavisi, genel asit müsinleri ile sülfatlı müsinleri ayırt edecektir. Farklı magnezyum klorür konsantrasyonları ile hazırlanan alsiyan mavisi, hyaluronik asit, kondroitin sülfat, keratin sülfat ve heparin gibi mukosubstansları gösterecektir.
Bağ dokusu müsinleri, toluidin mavisi gibi metakromatik boyalarla da gösterilebilirken, Southgate müsikarmini karboksilatlı veya zayıf asidik müsinleri gösterecektir. Belirli kimyasal grupların (örneğin karboksil) boyanmasını önlemek için bloke etme teknikleri, muamele edilen bölümlerde boyama olmamasıyla özgüllüğü geliştirmek için kullanılır.
Pigmentlerin Gösterilmesi
Pigmentler normal ve patolojik materyalde bulunabilir ve doğal olarak veya doku fiksasyonu veya boyanmasının bir artefaktı olarak oluşturulabilir.
Artefaktlar
Bunlar genellikle fiksasyon sırasında meydana gelir ve formaldehitin kanla reaksiyona giren asit solüsyonları (formalin pigmenti) tarafından oluşturulabilir. Nötr olarak tamponlanmış formalin çözeltilerinin kullanılmasıyla önlenebilirler. Cıva bazlı fiksatifler (örn. Zenker) dokularda cıva tuzu birikintisi bırakacaktır. Bu pigmentlerin her ikisi de boyama başlamadan önce kolaylıkla çıkarılır.Bazı yaygın pigmentleri ve bunları göstermek için kullanılan yöntemleri listelemektedir.
Mikroorganizmalar
Histolojik olarak gösterilebilen mikroorganizmalar arasında bakteriler, viral kapanımlar, mantarlar ve spiroketler bulunur. Metilen mavisi gibi basit lekeler, genellikle bir bölümdeki organizmaların varlığını tanımlamanın hızlı ve kolay bir yolunu sağlar. Bununla birlikte, metilen mavisi yalnızca morfolojileri ile ilgili bilgi sağlayacaktır.
Bakteriler
Bakteriler, Gram’ın kristal mor boyası ile boyama reaksiyonlarına göre Gram pozitif veya Gram negatif olarak ayrılır. Gram-pozitif bakteriler, aseton veya alkolde farklılaşmanın ardından lekeyi tutarken, Gram-negatif bakterilerin rengi giderilir.
İyotun bir mordan veya “tutucu ajan” olarak kullanıldığı kristal mor boyayla boyamanın ardından, Gram-pozitif bakterilerin sitoplazması içindeki boyayı önceden sıkıştırarak, Gram-negatif bakterileri göstermek için kırmızı bir zıt boya kullanılır. Bu teknik beceri gerektirir, çünkü kristal menekşeyi aşırı farklılaştırarak Gram-pozitif bakterileri kırmızıya çevirmek mümkündür.